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全国临床检验操作规程〔第3版〕
精液检查
一．标本收集
，二次之间间隔应>7天，但不超过3周。
，但不超过7天。
。
，不宜采用避孕套内的精液。某些塑料容器具有杀精子作用，但是否适宜应事先做实验。
***精液全部送检。
~40℃。
〔或〕识别号〔标本号或条码〕，标本采集日期和时间。
，精液也必须按照潜在生物危害物质处理，因为精液内可能含有肝炎病毒、人类免疫缺陷〔病毒〕和疱疹病毒等。
二．一般性状检查
一般性状检查包括记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。
正常精液呈灰白色或乳白色，不透明。棕色或红色提示出血。黄色可能服用某种药物。精子浓度低时精液略显透明。
正常精液是一种均匀黏稠的液体，***后立即凝固，30 min后开始液化。假如液化时间超过60 min考虑为异常，应记录这种情况。正常精液可含有不液化的胶冻状颗粒。
用刻度量筒或移液管测定。正常一次全部***精液量约2~5 ml。精液量过多或过少是不育的原因之一。
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在精液全部液化后，用Pasteur滴管吸入精液，然后让精液依靠重力滴落，并观察拉丝长度。正常精液呈水样，形成不连续小滴。黏稠度异常时，形成丝状或线状液滴〔长度大于2 cm〕。也可使用玻璃棒或注射器测定黏稠度。
用精细试带检查。~，。
三．精子存活率
精子存活率〔motility〕用活精子比例来反映。
【试剂】
5 g/L伊红Y染色液：伊红Y g，加生理盐水至100 ml。
【操作】
在载玻片上加新鲜精液和伊红溶液各1滴，混匀后，加上盖玻片，30 s后在高倍镜下观察，活精子不着色。死精子染成红色。
计数200个精子，计算未着色〔活精子〕的百分率。
【试剂】
〔1〕10 g/L伊红Y染色液：伊红1 g，加蒸馏水至100 ml。
〔2〕100 g/L苯***黑染色液：苯***黑10 g，加蒸馏水至100 ml。
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【操作】
取小试管，加新鲜精液和伊红溶液各1滴，混匀。
30 s后，加苯***黑溶液3滴，混匀。
30 s后，在载玻片上，加精液-伊红-苯***黑混合液1滴，制成涂片，待干。
油镜下观察，活精子为白色，死精子染成红色，背景呈黑色，计数200个精子，计算未着色活精子的百分率。
〔HOS〕
【试剂】
膨胀液： g， g，加蒸馏水至100 ml。分装，- 20℃冷冻保存，使用前解冻，并充分混匀。
【操作】
取小试管，加1 ml膨胀液，37℃预温5 min。
ml液化精液，轻轻搅匀，在37℃孵育至少30 min。
在相差显微镜下观察精子，膨胀精子为尾部形状发生变化的精子，即活精子。计数200个精子，计算膨胀精子的百分率。
【参考区间】
在排精30~60 min内，约有70%以上精子应为活动精子。精子低渗膨胀试验应有60%以上精子出现尾部膨胀。
【附注】
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如室温低于10℃时，应将标本先放入37℃温育5~10 min后镜检。
某些标本试验前就有尾部卷曲的精子，在HOS试验前，计算未处理标本中尾部卷曲精子的百分数，实际HOS试验结果百分率就等于测定值减去未处理标本中尾部卷曲精子百分率。
HOS也是精子尾部膜功能试验。
四．精子活力
WHO推荐一种无需复杂设备而能进展简单精子活力〔activity〕分级的方法。
【操作】
取10 μl标本涂片，连续观察至少5个视野，对200个精子进展分级，首先计数a级和b级精子，随后在同一视野内计数c级和d级精子。
【结果判断】
根据下述标准把精子活力分为a、b、c、d四级。
a级：快速前向运动：37℃时速度≥25 μm/s，或20℃时速度≥20 μm/s〔25 μm大约相当于精子5个头部的长度，或半个尾部的长度〕。
b级：慢速或者呆滞的前向运动。
c级：非前向运动〔＜5 μm/s〕。
d级：不动。
【参考区间】
正常精液采集后60 min内，a级+b级精子达50%以上。
五．精子计数
【试剂】
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精子稀释液：碳酸氢钠5 g，40%甲醛溶液1 ml，蒸馏水100 ml，待完全溶解