文档介绍：放射免疫分析技术
（Radioimmunoassay，RIA）
核医学
治疗：肿瘤、甲亢等
诊断 体内——PET、SPECT、
放射免疫成像等游离标记物的非特异性结合尽可能小
试剂来源广泛、价格低廉
b. 常用的分离方法
二抗法：非特异性低，但沉淀较差
PEG 法：沉淀较好，但非特异性高
二抗-PEG 法：较好，现常用
磁化颗粒法：
固相法：现较常用
（4）添加剂的问题
a. 防腐剂：低浓度 NaN3 对分析的影响小
b. 抗凝剂：EDTA、肝素对分析无影响
c. 抑肽酶：对一般分析无影响
6. 放射免疫分析的数据处理
（1）数据处理的基本步骤
a. 作图法
b. 数学模型法
（2）几种数学模型
a. 一般多项式函数：普适性差，现基本不用
b. 直线法：logit-lg 转换
c. 四参数 Logistic 模型：目前常用
7. 放射免疫分析的质量控制
（1）放射免疫分析中的误差及引起误差的原因
a. 系统误差：由于某些特定的原因造成的带有倾向性的误差
试剂误差：标准品不准；标记物变质；抗体失效；分离剂的影响
仪器误差：测量仪器不准；加样器不准
分离误差：分离不完全或失误
数据处理误差：选用数学模型不当
b. 随机误差：偶然因素造成的误差
同位素计数的统计涨落
（2）放射免疫分析的质量控制指标
a. 精密度：即重复性，是评价随机误差的指标，用标准差（SD）、变异系数（CV）、精密度图（PDP）表示
b. 准确度：指测定值与真值的符合程度，偏离程度叫偏差，常以偏离真值的百分比表示，常用回收试验及平行性实验来评价
c. 灵敏度：指测定方法的最小可测值， 即能与零剂量相区别的最小剂量，以零剂量点结合率的均数减两个标准差后的结合率的对应值作为最小可测值
d. 特异性：常用交叉反应率来表示
e. 稳定性：即批间的重复性， 常以剂量反应曲线参数的稳定性来评价，主要有零管结合率（B0%）、非特异性结合率（NSB）、剂量反应曲线函数、相关系数
f. 临床有效性：诊断符合率，假阴性率、假阳性率
（3）日常检测工作中的内部质量控制
a. 实验室内的批内质量控制
b. 实验室内的批间质量控制
c. 实验室之间的外部质量控制：对同一样品在不同实验室测定结果作评判
8. 放射免疫分析的临床应用
临床常用近 200 种
（1）肿瘤相关抗原的测定：AFP、CEA 、CA199、CA-125、CA153、CA724、CYFRA211、PSA 等
（2）激素的测定：下丘脑-垂体-甲状腺轴激素，下丘脑-垂体-性腺轴激素，下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴激素，胃肠道激素，心血管激素，甲状旁腺素与降钙素，生长激素等
（3）非激素蛋白质的测定：铁蛋白、各种尿微量蛋白、铜蓝蛋白、肌红蛋白、血栓素、III 型前胶原肽、层黏蛋白等
（4）酶的测定：前列腺酸性磷酸酶、SOD、NSE 等
（5）药物及维生素的测定：***、叶酸、VitB12 等
（6）免疫分子的测定：各种 Ig、抗 DNA、IL、CD、CIC
（7）病原学研究：现已基本淘汰，但细菌代谢产物的测定仍有一定的价值
（8）其它：甘胆酸、透明质酸等
二、荧光免疫分析技术（Fluoroimmunoassay，FIA）
1941年 Coons 等发明，最早建立的一种标记免疫技术
用荧光素标记抗体或抗原，借助荧光检测仪察看荧光现象或测量荧光强度，从而判断抗原或抗体的分布或含量
常用荧光免疫的类型
（1）荧光免疫染色：主要用于抗原抗体的定位，用荧光显微镜观察
（2）荧光免疫测定
a. 荧光偏振免疫测定（FPIA）
b. 荧光酶免疫测定（FEIA）
（3）时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）
三、酶免疫测定（EIA）
1. 均相酶免疫测定法：
主要用于测小分子抗原。酶标抗原与待测抗原竞争结合定量抗体
2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：
为固相、非均相酶免疫测定法，目前应用最广泛的定性标记免疫分析技术，也可用于定量分析。1971 年 van Weeman（荷）等发明
3. 生物素-亲和素系统免疫检测法
生物素标记一抗或二抗，酶标记亲和素
4. 斑点免疫结合试验
用醋酸纤维素膜为固相载体
（1）斑点酶免疫渗滤试验
（2）斑点免疫金渗滤试验
（3）斑点免疫金层析试验
四、发光免疫分