文档介绍：第一章形态学检验技术
生物检验技术最主要的是掌握分析方法的一般要求,而在进行分析或者检验之前,一切必须从生物样品的采集开始,还包括样品的预处理和制备。随后的检验和分析可以千差万别,例如确定病原生物的种类、药物作用的时空变化、遗传基因的改变、食品毒物的含量等,这包括微生物检验、生物化学检验和分子生物学检验。但在这些检验方法使用之前,必须进行一系列的形态学检测。形态学检验需要逐步的在不同层次上展开进行,即感官层次、显微结构层次和超显微结构层次。
第一章形态学检验技术
第一节生物样品的采集、预处理和制备
第二节感官层次的形态检验
第三节显微形态检验技术
第四节超显微形态检验技术
第一节生物样品的采集、预处理和制备
样品采集的一般要求
采样的最一般方法
样品的制备
生物样品的预处理
样品采集的一般要求
采集的生物样品要具有
代表性
典型性
适时性
代表性
指采集的对象能够代表一定范围内的整体或者所有的样品。这就要求对样品的分布、类型、特征、地形地貌、环境、气候等因素进行综合考虑,选择合适的地段作为采样区,再在采样区内划分若干小区,采用适宜的方法布点,确定有代表性的个体或样品。例如在田地里采样,不要采集田埂、地边及距田埂地边2米以内的植株。
典型性
指所采集的生物个体的部位要能充分反映通过检验所要了解的情况。根据要求选取健康的生物个体,分别采集个体的不同部位,例如动物的血液、尿液、内脏、骨髓、肿瘤等,不能将各部位样品随意混合。
适时性
指需要充分注意生物的不同生长发育阶段。发育阶段的改变,也影响着样品的性质和生理。有些生物的有效成分在一昼夜间也常有变化,其他如生长地点、光照、土壤、其他环境条件等,对生物样品的特性均有一定影响。
同时还要注意样品采取后应该及时处理的时间。例如生物用药后的间隔时间;植物叶类应规定采嫩叶或老叶,采收的时间及层次,即生长在植株的不同位置,如上层、中层、下层;花类应严格规定采收时期及部分,如蕾期、开花前期或盛花期,采收全花、花被、柱头或其他部分等。
植物标本的采集注意事项
(1)采集的植物全株样品最好带有繁殖器官(花、果或孢子囊、子实体等),草本植物特别应该注意带有叶的部分和地下部分,寄生植物应带寄主。
(2)如果植物的基部叶与上部叶形状不同(如菊科、十字花科),叶上的附属物(毛茸、蜡被等)在新老叶上也有不同,应尽量采全。
(3)丛生的草本植物,应保留其丛生的特征,不要分得太散,失去原来的习性
(4)雌雄异株的植物(麻黄科、桑科等)应注意同时采集雌株和雄株。
(5)对于含水分较多(如景天科、仙人掌科等)或有根状地下茎植物(如百合科),有时需切开干燥或用开水将其烫死。
(6)水生藻类植物采的标本,到驻地后要重新放在水里,然后用硬台纸将其托起,压成标本。
(7)木本植物的树皮在鉴别上有重要的特征,采集标本时应割取,并与标本同存。
(8)每种植物至少采集3份以上标本,每张标本应有野外记录。对易改变的特征如花的颜色、气味、毛茸等应说明。每晚必须及时整理检查,补上漏记的项目。
动物样品的采集
动物的尿液、血液、粪便、毛发、指甲、唾液、胃液、乳液、骨骼和组织等均可作为检验样品。
(1)尿液:绝大部分毒物及其代谢产物主要由肾脏经膀胱、尿道随尿液排出。
(2)血液:血液中有害物质的浓度可反映近期接触污染物质的水平,并与其吸收量呈正相关。
(3)毛发和指甲:蓄积在毛发和指甲中的污染物质残留时间较长,即使已脱离接触污染物或停止摄入污染食物,血液和尿液中污染物含量已下降,而毛发或指甲中仍容易检出。头发中的汞、砷等含量较高,样品容易采集和保存,故在医学和环境分析中应用较广泛。
(4)组织和脏器:组织和脏器的部位复杂,且柔软、易破裂混合,因此取样操作要细心。采集组织和脏器样品后,应放在组织捣碎机中捣碎、混匀,制成浆状鲜样备用。
采样的最一般方法
①采样前应预先准备好采样工具,如刀具、剪刀、保存袋、手套、冰盒、标签、记录本、采集登记表等;
②根据实际情况确定样品采样量:为了确保有足够数量的样品进行检测分析,应根据检测分析项目的内容要求确定样品的采集量。一般要求样品经制备后,至少有20~50g的干样品,最好备有1kg的干样;
③整体样品需要在采样区内按梅花形五点或交叉间隔的取样方式采集5-10处的样品混合组成一个代表样品;
④生物体上的某一部分作为样品,如果分布在一个部位,可以取此部分的全部作为样品;如果分布在多处,则每处取少量样品再加以混合。
⑤将采好的样品装入保存袋中,可能还要放入冰盒中存放,贴好标签,并填写采样登记表。
⑥平均样的获得:四分法、切成块的1/4-1/8混合。