文档介绍:实验一 常用玻璃器皿的清洗及包扎
(一) 熟悉微生物实验所需各种常用器皿的名称和规格。
(二) 学会正确的清洗玻璃器皿的方法和包扎方法
为了包装实验顺利进行, 要求把实验用器皿清洗干净, 保持灭菌后无菌状态, 视,用粗调节器将镜筒小心地降下,使油镜浸在镜油中并几乎与标本相接,将聚光器升至最高位置并开足光圈,用粗调节器将镜筒徐徐上升,直至视野中出现物象并用细调节器使其清晰为止。
(六)显微镜用后处理
,取下载玻片。
,然后擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上的残留的油迹,然后
再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。
,用绸布清洁显微镜的金属部件。
,反光镜垂于镜座,将物镜转成“八字形“再向下旋,同时把聚光镜降下,
以免物镜与聚光镜发生碰撞危险。
五、实验报告
(一)结果 分别绘出在不同物镜下观察到的不同菌种的形态,同时注明放大倍数。
(二)思考题
?应特别注意什么?
?
实验三 酵母菌形态观察
一、 目的与要求
观察酵母菌的形态及出芽繁殖方式。
二、 原理
大小通常比细菌大几倍甚至于十几倍,大多数的酵母以出芽方式进行无性繁殖,有的二分裂繁殖。用美兰支制成的水浸片,可观察酵母的形态和出芽繁殖方式以及进行死活细胞的鉴别
(染成蓝色的为死细胞,无色的为活细胞) 、
三、
材料与仪器
(一)
啤酒酵母,假丝酵母,汉逊酵母。
(二)
显微镜,载玻片,盖玻片,接种针,酒精灯。
(三)
吕氏美蓝染液。
四、
操作步骤
(一)
在干净载玻片中央加一滴吕氏美蓝染色液,
以无菌操作接种环挑取少量酵母菌体放
于美蓝液中,混合均匀。
(二)
取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下(以免产生气泡)
,
使其盖在菌液上,将多余菌液用吸水纸吸干。
(三)
将盖玻片置于载物台上,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况,
并
根据颜色来区别死活细胞。
(四)
,注意四细胞数量是否增加。
五、
实验报告
(一)结果绘图说明你所观察到的酵母形态特征。
(二)思考题
在显微镜下,酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌?
酵母水浸片制作室应注意什么?
实验十三
培养基的制备
一、
目的与要求
(一)
学****制备培养基的基本技术。
(二)
制备牛肉膏蛋白琼脂培养基。
二、
原理
牛肉膏蛋白培养基时一种应用最广泛和最普通的细菌培养基,
这种培养基中含有一般细菌生
长繁殖所需要的最基本的营养物质,可供繁殖之用。制作固体培养基时须加
2%琼脂,培养
细菌时,应用烯酸或稀碱将
PH调至中性或微碱性。牛肉膏蛋白培养基的配方:牛肉膏
0.%5
蛋白胨1%
%
~.
三、
材料与仪器
(一)
试剂
牛肉膏,蛋白胨,Nacl,琼脂1mol/L;NaoH1mol/LHCL
(二)
其他
试管,三角烧杯,烧杯,量筒,漏斗,乳胶管,弹簧夹,纱布,棉花,牛
皮纸,线绳,pH试纸,电炉,台秤。
四、
操作步骤
(一)
称量
根据用量按比例依次称取各种成分,
牛肉膏常用玻棒挑取,
放在小烧杯或表面皿
中称量,用热水熔化后倒入烧杯,蛋白胨易吸湿,称量时要迅速。
(二)溶解在烧杯中加入少于所需要的水量,加热,逐一加入各成分,使其溶解,琼脂在溶液煮沸后加入,融化过程需要不断搅拌。加热时应注意火力,勿使培养基烧焦或溢出。溶好后,不足所需水分。
(三)调PH用1 mol/L NaoH把pH调至所需范围。
(四)过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察,如无特殊要求时可
省去此步骤。
(五)分装
按实验要求,可将配置的培养基分装入试管内或三角瓶内,分装装置如实验图
-8所示:分装时注意,勿使培养基沾染在容器口上,以免沾污棉塞引起污染。
1.液体分装
分装高度以试管高度的
1/4左右为宜,分装三角瓶的量则根据需要而定,一
般以不超过三角瓶容积的
1/2为宜。
2.固体分装
分装试管,其装量不超过量筒的
1/5,灭菌后制成斜面,斜面长度不超过管