文档介绍：丙型肝炎与肝细胞癌海南丙肝治疗医院
HCV基因结构
5’NC 3010-3033aa 3’NC
3抗体检测用酶免疫测定法（EIA）------优点多，方便、重复性好、成本低
EIA-1是用HCV-NS4基因段重组抗原，命名为C100-3--------敏感性及特异性均不理想
仅80%患者HCV抗体阳性
假阳性很高
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筛选试验——HCV抗体测定
第二代HCV抗体
EIA-2(1992)试验含有NS4、核心及NS3基因抗原-----代表了多种抗原
敏感性及特异性有改善
HCV血清阳转平均窗口期（window periods）明显缩短
血清阳转的平均时间 EIA-２----１０周左右
EIA-1------16周
阳性率为95%
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筛选试验——HCV抗体测定
第三代HCV抗体测定
EIA-3含有重建核心和NS3抗原及NS5抗原
敏感性有增加(97%)
血清阳转时间为2-3周
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HCV抗体测定的其他试验
第二代RIBA-----抗HCV补充性试验
内含抗原与EIA-2相同
但以免疫印迹形式
结果可解释为阳性、可疑及阴性
高危人群中的抗HCV阳性标本，没有必要行补充试验
第三代补充试验（RIBA-3）其特异性更好
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HCV-RNA定性试验
逆转录PCR
RT-PCR方法各家不一，缺乏标准化
有许多因素影响着PCR方法，如标本处理及储存形式，引物设计、扩增倍数、反应条件、DNA产物的污染、扩增后产物检测系统等
严格的质控、操作人员的熟练程度尤为重要
药盒并不能完全保证结果的可靠性
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HCV-RNA定量试验
估价血清中HCV-RNA水平
反映感染机体的病毒复制率及清除率
在未治疗的慢性丙肝机体内病毒负荷相对稳定
目前有二种方法可定量HCV-RNA水平，即靶扩增技术如定量PCR方法及信号扩增技术如支链DNA法
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HCV基因型测定
检测基因型方法一般分为二类 ：
⑴ 检测HCV基因的点突变的筛选试验
⑵ 评估HCV基因更大片段的验证性试验
HCV基因型的筛选试验有 ：
(1)对HCV高度保守的5’-NC区域行限制性片段长度多
型性分析（RFLP）
(2)对HCV-5’NC区域行逆转录斑点杂交分析，又名
LIPA方法
(3)用型特异的引物对HCV核心基因巢式PCR。在临
床应用中RFLP与LIPA差异较小。
(4)病毒蛋白抗原性分型
评估HCV基因更大片段的验证性试验-----序列分析
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丙肝的临床诊断
抗HCV（EIA-2）+
确诊 RIBA-2 PCR
肝穿 阴性 可疑 阳性 阳性 阴性
排除 PCR 肝穿 随访 排除
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肝病严重程度的评估
肝活检-----黄金标准
ALT水平------不能反映肝病的严重程度
血清HCV-RNA水平-----不能评价肝病的严重程度
HCV基因型----HCV-1b型与严重肝病之间无关系
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肝活检在丙肝中的作用
适应症 :
(1) 持续性或间歇性ALT异常>6月
(2) 疑有其他肝病如酒精性、脂肪肝或血色病等
禁忌症：
(1)凝血功能严重异常
(2)终末期肝病
肝活检的不利因素 :
(1) 产生并发症
(2) 患者拒绝
(3) 费用
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肝炎活动度的评价
丙肝的组织学特征 :
⑴脂肪变性
⑵淋巴细胞浸润或淋巴滤泡形成
⑶胆管损伤
非绝对，偶出现在慢乙肝或自体