文档介绍：微生物学实验报告计划
微生物学实验报告计划
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微生物学实验报告计划
微生物学实验报告
微生物学实验报告
实验一 一般光学显微镜的使用及细菌染色与形态察看
第一部分：显微镜的使用
一、目的要求
1．熟****一一样，光芒会发生折射，不单使进入物镜的光芒减少，降低了视线的照明度，并且会减少镜吵嘴。当以香柏油
（）为介质时，因为它的折射率与玻璃邻近，光芒经过载玻片后可直接
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经过香柏油进入物镜而不发生折射，不单增添了视线的照明度，更重要的是通
过增添数值孔径达到提升分辨率的目的。可见光的波长均匀为μm。当使用数值孔径为的高倍镜时，它能鉴识两点之间的距离为μm；而使用数值孔径为的油镜时，能鉴识两点之间的距离则为μm。采用香柏油是因为它的折射率是
4、显微镜有哪几种？各自的主要特点是什么？
答：光学显微镜中除明视线显微镜外，还有暗视线显微镜、相差显微镜和荧光显微镜；除光学显微镜外，还有电子显微镜。
暗视线显微镜：在一般光学显微镜载物台下安装一个暗视线聚光器即成暗视线显微镜。
相差显微镜：相差显微镜成像的原理和一般光学显微镜相同，所不一样的是相差显微镜包含有环状光阑、装有相板的相差物镜和全轴调整望远镜三个特别部分。
荧光显微镜：荧光显微镜的主要特点是以紫外线为光源，当照耀到用荧光素标志的细菌时，荧光素汲取了紫外线的能量后，再发射出可见的橙、黄、浅绿色荧光。因为用荧光素标志的菌体各样结构中的溶解、吸附或化合状况不一，于是发出不一样色彩解亮度的荧光，进而能够察看细菌的不一样结构。
电子显微镜：电子显微镜的基本结构和工作原理与一般光学显微镜特别相像，不一样的是用电子流取代光芒，用电磁圈取代透镜聚焦。
第二部分：细菌形态学检查方法
一、目的要求
1、认识不染色标本检查法，用悬滴法察看活细菌及其动力。
2、熟****染色标本的制备过程，掌握革兰氏染色法及其结果判断，认识革兰氏染
色法原理。
3、认识其余常用染色法。
二、实验原理
检查细菌形态的主要工具是显微镜，可依据不一样目的将细菌染色或不染色进行镜检。常用的碱性染料有结晶紫、美蓝、碱性复红等。
染色法又分单染色法和复染色法两大类。单染色法即仅用一种染料着色，全部的细菌均被染成一种颜色，无鉴识细菌的作用。复染色法又称鉴识染色法，往常用二种或二种以上的染料着色，因为不一样种类的细菌或同种细菌的不一样构成结构对染料有不一样的反响性而被染成不一样的颜色，进而有鉴识细菌的作用。
2、最常用的细菌复染色法是革兰氏染色法（Gramstain）。经过革兰氏染色法操作，可把细菌分红两大类：革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。凡能使第一种染料结晶紫保存蓝色的细菌叫革兰氏阳性细菌，凡被洒精脱色后染上对照颜料沙黄或稀释复红而呈红色的细菌叫做革兰氏阴性细菌。
三、实验内容
（一）染色标本的制备及察看
1、复染色法（革兰氏染色法）
资料：葡萄球菌琼脂培育物
1
支
大肠杆菌琼脂培育物
1
支
革兰氏染液一套：结晶紫、95%酒精、路哥氏碘液、稀释复红各
1瓶。玻片，
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接种环，酒精灯，吸水纸等。
方法：
（1）涂片 用葡萄球菌和大肠杆菌混淆涂片。
①取玻片一块，拭净。
② 用无菌接种环取生理盐水一滴，放在玻片中央（如被检资料是液体，可不加生理盐水）。
③左手斜持菌种试管，右手将菌种试管棉塞略加转动，以便拔下。
④ 右手持接种环，经火焰灭菌后，用右手小拇指拔开菌种试管棉塞，试管口经过分焰，将接种环插入试管中取菌少量（切不行多，更不行将培育基刮下）。
⑤试管口再经过分焰，塞好棉塞。
⑥ 将接种环上的细菌加入玻片上之水滴内，磨匀，涂成直径为1cm大小的薄菌膜。
⑦接种环经火焰灭菌。.
（2）干燥 涂片置于空气中，使其自然干燥。
（3）固定 干燥后将涂片在火焰上慢慢经过三次，此为“固定”。目的是使细菌粘于玻片上，染色和水冲时不易零落；且细菌为蛋白质，被热凝结可保持完好形态。
（4）染色 初染→媒染→脱色→复染
①加结晶紫染液于标本上，使其覆满标本，染 1~2分钟。
②细水冲刷。
③加路哥氏碘溶液经 1分钟。
④水洗。
⑤加95%酒精于玻片上往返流动，倾去酒精。这样重复 2~3次（约30秒钟）。
⑥水洗。
⑦加稀释复红染液，染约 1分钟。
⑧水洗，用吸水纸吸干。
（5）镜检 革兰氏阳性菌在结晶紫着色后不易被酒精脱色，故仍为深蓝色或紫色；革兰氏阴性菌在结晶紫着色后易被酒精脱色，故经稀释复红复染后成红色。
三、实验记录
革兰氏染色过程：取玻片一块，在玻片上滴三小滴水（有必定的距离），分别用接种环