实验影响酶促反应的因素.ppt

文档介绍：实验影响酶促反应的因素
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实验原理
酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止。随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最适温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多数酶的最适温度在 37℃左右。如温度过高，实验影响酶促反应的因素
第1页，本讲稿共10页
实验原理
酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止。随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最适温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多数酶的最适温度在 37℃左右。如温度过高，反应速度反而下降，甚至停止。这主要由于酶蛋白因高温变性失活之故。
酶活性与溶液pH有关，pH既影响酶蛋白本身构象，也影响底物解离程度，从而改变酶与底物结合和催化作用。故每种酶都有其最适pH的作用环境。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。。***离子对该酶活性有激动作用，铜离子则有抑制作用。
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本实验利用碘与淀粉及其水解产物(大分子糊精、麦芽糖)的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在不同条件下催化淀粉水解的速度，从而判断温度、pH、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。
淀粉………………→糊精……………→麦芽糖
与碘呈
蓝色
与碘呈
紫色至红色
与碘
不呈色
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试剂
1．1％淀粉溶液
2．新鲜配制的稀释唾液
3．不同pH缓冲液
(1)
(2)
(3)
4．％NaCI溶液(即生理盐水)
5．1％CuSO4溶液
6．碘液
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操作
1．温度对酶活性的影响
(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂
(2)混匀后，三支试管分别置于冰浴、沸水浴、恒温水浴(37℃)中预温5分钟。再向各管加入稀唾液5滴，继续在原水浴中放置10分钟。
(3)取出各管，各滴加碘液1滴(切忌摇动)，观察颜色并记录。
管号
试剂（滴）
1
2
3

15
15
15
1％淀粉溶液
5
5
5
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2．pH对酶活性的影响
(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂
(2)将各管摇匀，同时置37℃水浴中恒温10分钟
(3)取出各管，各滴加碘液1滴(切忌摇动)，观察颜色并记录。
管号
试剂(滴)
1
2
3

15

15

15
1％淀粉溶液
5
5
5
稀唾液
5
5
5
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3．激动剂、抑制剂对酶活性的影响
(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂
(2)将各管摇匀，同时置37℃水浴中恒温10分钟
(3)取出各管，各滴加碘液l滴(切忌摇动)，观察颜色并记录。
管 号
试剂(滴)
1
2