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实验室常用溶液配制.docx

上传人:cjl201702 2022/1/21 文件大小:25 KB

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实验室常用溶液配制.docx

文档介绍

文档介绍:实验室常用溶液的配置
Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL
称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30C冻存
X-gal:贮存浓度为20mg/mL
称取20mgX-gal溶于1mL二***甲酰
用20mLL乙酸钠溶液(pH=)溶解DTT,过滤除菌后分装
考马斯亮蓝R-250染液
在90mL甲醇:水(1:1)和10mL冰乙酸混合液中溶解考马斯亮蓝R-250,过滤
后室温保存
蛋白酶K(20mg/mL)
灭菌的50mMTris(pH),mM乙酸钙溶解,配置成浓度为20mg/mL的溶液,
-20℃保存
流式缓冲液PBS+5%FBS+%sodiumazide
Water45mL
20%叠氮钠50叱L
10*PBS5mL
FBSmL
文献常见配方:PBS+%BSA(5-10%FBS)+%sodiumazide
酸酐
称取50g重铭酸钾(KCrO4)溶于80mL双蒸水中,90c中?§解2h,每半小时
搅拌促进溶解,溶解完成后,加入1000mL硫酸,分装于2个瓶子中。注意使用
过程中,如果其中一瓶的效果不好,不要混合使用。使用5次,就要重配。
滴管
酸酊中浸泡24h,自来水冲洗至无明显可见颜色,自来水正反面各20遍,双蒸
水正反面各20遍,复印纸中包裹,烘干,加棉花塞和胶头,单独包装,灭菌,
烘干。
双抗(青霉素和链霉素)
g链霉素和80WU青霉素,一起溶于8mlPBS,单位分别为10A5ug/ml和10A5U/ml,然后稀释10倍,分别为10A4ug/ml和10A4U/ml,使用时,按照1%加入,分别为100ug/ml与100U/ml
培养基I
2%FCS,1%双抗,128uL/40mL肝素钠,RPMI1640
成关主tII
培养基II
%FCS,1%双抗,128uL/40mL肝素钠,RPMI1640
完全培养基
10%FCS(5%FCS+5%鱼血清),1%双抗
LPS
称取2mgLPS溶于1mLPBS中,滤膜过滤,硅化离心管,-20C保存
1*Turk染液
GentianVioler(结晶紫)50mg
AceticAcid(冰乙酸)5mL
Water495mL1%巴比妥钠
1g巴比妥钠溶于100mL的PBS中,充分混匀,避光保存(80ug/g用量)
诱导小鼠腹腔巨噬细胞所需溶液
硫代硫酸盐肉汤培养基(Thioglycollatebroth):
称取3g,加入到100ml纯水中,高温121c灭菌15min,然后冷却到室温,
再重复2次,进行老化操作。此时已经溶解,呈现透明溶液。
冲洗液:
RPMI1640+1%双抗
培养基:
RPMI1640+10%FBS+1%双抗
***化钱红细胞裂解液(10X的储存液)参考流式中文网
gNH4ClM)
gNaHCO3(100mM)
gEDTA二钠(10mM)
加水至900ml,然后用1M的HCl或1M的NaOH调节pH值至。最后加水至1升。
该10*的储存液可在4℃保存6个月。
工作液的配制:在使用前蒸馏水稀释10倍即可。(1份储存液加上9份水)。工
作液用来裂解红细胞。不能以<10*的浓度储存,否则会形成碳酸铵而失效。
ACK裂解液参考文献Dynamicvariationin