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葡萄球菌检测..ppt

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文档介绍:金黄色葡萄球菌的生物学特性
金黄色葡萄球菌的抗原构造及分型简介
金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌的流行病学
金黄色葡萄球菌的检验方法
金黄色葡萄球菌肠***的检测
金黄色葡萄球菌的快速检测方法
金黄色葡萄球菌污染的控制

第一页,共黄色葡萄球菌的流行病学

  近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。

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金黄色葡萄球菌的流行病学特点

  季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
  上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。

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金黄色葡萄球菌的流行病学

  一般说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:
  食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠***,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对***其他部位的污染。

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*金黄色葡萄球菌肠***是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠***引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占45%,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。肠***形成条件:
  存放温度,在37℃内,温度越高,产毒时间越短;
  存放地点,通风不良氧分压低易形成肠***;
  食物种类,含蛋白质丰富,水分多,同时含一定量淀粉的食物,肠***易生成。

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金黄色葡萄球菌的检验

1、样品制备
  按无菌操作取检样25 g(mL),加入225 mL灭菌生理盐水,固体样品研磨或置均质器中制成1:10样品混悬液。   供计数检验时,可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。

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金黄色葡萄球菌的检验

2、增菌及分离培养
吸取5 mL混悬液,接种于7.5%***化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内,36℃±1℃培养24 h,转种血平板和Baird-Parker平板, 36℃±1℃培养24 h,挑取血平板上金黄色(有时为白色)菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。

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血平板上金黄色葡萄球菌
菌落形态

金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色,有时也为白色,大而突出、圆形、不透明、表面光滑,周围有溶血圈。


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金黄色葡萄球菌
在BP平板上的菌落形态
  
  在Baird-Parker琼脂平板上菌落呈圆形,表面光滑、凸起、湿 润,直径2~3 mm。灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈 (沉淀),其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱 水食品中分离的菌落,其黑色常较典型菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地较干燥。

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金黄色葡萄球菌
在甘露醇盐平板上的菌落
 
Staphylococcus aureus on mannitol salts agar

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3、血浆凝固酶试验:
吸取1:4新鲜兔血浆0.5 mL,放入小试管中,再加入培养24 h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培养物0.5 mL,振荡摇匀,
置 36±1℃温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察6 h,如呈现凝固,即将试管倒置或 倾斜时,呈现凝块者,被认为阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。

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金黄色葡萄球菌肠***的检测
一、动物学试验 主要用幼猫和猴。
二、血清学试验 肠***作为抗原,可以和特异性抗体发生结合性反应,产生可见沉淀。
用血清学反应检验金黄色葡萄球菌肠***,方法主要有:
免疫琼脂扩散法
反向间接血凝试验
免疫荧光法
酶联免疫吸附法


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金黄色葡萄球菌快速检测方法

  目前,随着研究的深入,一些快速和采用现代技术的检测方法不断出现,这些新的快速方法,一般都缩短了传统检测方法的时间,能够较快地得到检测结果,并且操作相对简单。
  比如:法国梅里埃公司生产的RPF培养基、API检测系统等。梅里埃公司生产的mini VIDAS利用荧光免疫的方法检测葡萄球菌
肠***,在仪器上45 min可以得到结果。

第二十八页,共33页。
法国梅里埃公司生

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