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临床生化检验基础知识培训
生化基础知识
〔Reagent〕,最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应,通过生成物或反应物中某物质的吸光度变底物的减少量与反应时间成线性关系,反应速度保持恒定不变,这一时期称为零级反应期。随酶促反应继续进行,底物不断消耗,酶促反应条件逐渐变化,酶促反应速度逐渐减慢,产物生成或底物减少量的变化曲线遂趋平坦,这一时期称为一级反应期。此时的反应速率常常不能准确反应酶的含量。因此其测光点一般要求取在反应达到平衡前。
7、两点速率法：两点速率法也叫固定时间法,对测定与标准采用两个时间点测定。采用此方法的如肌酐〔苦味酸法〕,目前多数自动分析仪还是用 Jaffe 氏反应测肌酐,即肌酐能同碱性苦味酸盐生成红橙色化合物,这个反应特异性不高,因为维生素 C 、丙酣酸、丙酣、葡萄糖、乙酷醋酸、果糖、氨基马尿酸、蛋白质与其他反应产物亦能与碱性苦位酸盐生成红色化合物,血清中的这些假肌酐约含25%。但真性肌酐与苦味酸的反应为快反应,假肌酐为慢反应,因此测试时测试时间一般在样品与碱性苦味酸试剂混合后 25 秒和 1 分 25 秒在 500nm 处测吸光度变化。两时间点的吸光度变化之差,则为特异反应肌酐浓度。
8普通免疫比浊与胶乳增强免疫比浊法：
普通免疫比浊法：是抗原与相应的抗体直接结合形成的免疫复合物,在反应液中具有一定的浊度,可由一般分光光度法进行透射比浊测定,可用于某些蛋白质和药物浓度等的测定。该法须做多点校准,再经非线性回归,求出抗原或抗体的含量。
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胶乳增强免疫比浊法：是将抗体吸附在大小适中、均匀一致的胶乳颗粒上,制成致敏的胶乳颗粒,当遇到相应抗原时,发生交联反应,形成抗原抗体复合物,胶乳颗粒发生凝集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内并不阻碍光线透过,两个与其两个以上胶乳颗粒凝聚时则使透过的光减少,其减少的程度与胶乳颗粒凝聚的程度呈正比,即与待测抗原量呈正比,由此可检测样本中的特定抗原含量。
该法比普通免疫比浊敏感度高,试剂稳定,个体免疫复合物对结果影响也小,因此结果稳定、可靠,特异性好,精确度高。
9参考物的量值溯源性:通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链,使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准,通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。
10检测限：是指检测系统可检测出的最低分析物浓度。又称分析灵敏度。
11灵敏度与线性X围：灵敏度与线性X围有着紧密联系,这也是跟生化仪的性能有关。灵敏度与线性X围的取舍就要根据其医学决定水平而定。一般仪器能测的光密度值最大在35000。假设谋项目的医学决定水平在0~100,如果1个单位浓度变化能引起仪器吸光度响应量为1000,那么它能测的浓度X围为0~35,可以看出,虽然其灵敏度很高,但在其检测X围没有达到其医学决定水平,即线性X围太窄。相反,如果 1个单位浓度变化能引起仪器吸光度响应量为100,那么它能测的浓度X围为0~350,这个线性X围是可以的。因此,灵敏度与线性的评价,要根据其医学决定水平而定。
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终点法或两点速率法,必须通过使用标准液,建立一条标准曲线；
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速率法,采用标准液校正可消除系统误差,也可直接输入Factor值。
校准类型：
空白定标：以水做标准液,消除试剂本身对测试的干扰；〔酶类〕
两点定标：以水作为零点,标准液作为另一点,建立标准曲线；〔Y=AX+B〕
多点定标：两个以上的标准液建立一条标准曲线；〔 LOGIT-LOG 〕
：临床实验室检验结果对被检验者低正常还是异常,有何临床意义,如何用检验结果协助临床医生诊断和治疗,这就涉与到参考区间和医学决定水平了。
参考区间大多是采用正态分布的原理制定,以95%的分布区间〔x±2s〕即为参考区间的上、下限,少数用百分位数来制定参考区间。不论采用什么方法,总有少数正常人的测定值落在异常X围内。因此,假性结果是避免不了的。当结果接近上限或下限时,不要轻易下正常或有病的结论,要根据被测者的其他表征综合判断或过一段时间复查后,再做分析。
医学决定水平是由Barnett于1968年首先提出的。是指临床上必须采取措施时的检测水平。决定性水平是一个阀值,高于该值或低于该值,应决定对患者采取适当的治疗措施。医学决定水平可在疾病诊断中起着排除或确认的作用,对某些疾病进行分级或分类,或愈后做出估计,来提醒医生在临床上做出相应的处理方式。
医学决定水平与参考区间的区别在于它不仅对健康人的数值进行研究,以决定健康人的X围,同时还对有关疾病的不同病情的数据进行研究,以定出不同的决定性限值,以引