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总蛋白测定(双缩脲法)SOP.doc

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总蛋白测定(双缩脲法)SOP.doc

上传人:zxwziyou9 2022/1/23 文件大小:25 KB

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总蛋白测定(双缩脲法)SOP.doc

文档介绍

文档介绍:q 总蛋白测定(双缩脲法)SOP
原理:所有蛋白质分子都含有肽键。在碱性溶液中,肽键与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物。蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系,依q 总蛋白测定(双缩脲法)SOP
原理:所有蛋白质分子都含有肽键。在碱性溶液中,肽键与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物。蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系,依次可以计算蛋白质的含量。
方法:双缩脲法
试剂:总蛋白试剂 其含量为 氢氧化钠
酒石酸钾钠 32mol/L
碘化钾 20mol/L
硫酸铜 12mol/L
储存条件及有效期:(1) 原包装试剂在2℃-8℃避光贮存,有效期36个月。
(2) 试剂开盖后在2℃-8℃避光保存,稳定期30天。
5. 样本要求: (1) 样本种类:新鲜无溶血血清。
样本采集:,置于带分离胶试管中,标本采集后,3000r/min离心5min,分离血清,立即密封送检。
样本干扰:对反应吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果,遇上述情况建议重新采集。
样本保存:密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。
6. 检验步骤: (1) 开生化仪见生化仪的SOP。
操作步骤:参数设置 ;试剂装载;校准;质控;样本装载;测定;结果审查;报告。
参数设置
总蛋白测定参数
通道号
1
加样体积

R1体积
150 ul
主波长
540nm
次波长
660nm
方法
END
初始测量点
0
末始测量点
27
试剂装载 每天在生化仪上进行试剂检查,检测的样本数,如发现量不多或不能满足当天需要,则需要加试剂,注意同一批号,不同批号的不能混用。
校准 换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。
质控 在做样本之前每天做质控,质控符合要求才可以做样 本,不符合要求需要做校准,做完校准后,用校准品当样本来测,做质控。
样本装载 样本符合要求,放在试管架上,编号,上机检测。
测定
结果审查
报告
7. 参考值 55-85g/L
8 .临床意义:
+
(1) 血清总蛋白浓度增高
血清中水分减少,而使总蛋白浓度相对增高。凡体内水分的排出大于水分的摄入时,均可引起血浆浓缩,尤其是急性失水时(如呕吐,腹泻,高热等)变化更为显著,血清总蛋白浓度有时可达100-150 g/L。又如休克时,由于毛细血管通透性的变化,血浆也可发生浓缩。慢性肾上腺机能减退患者,由于钠的丢失而致继发性水分丢失,血浆也可出现浓缩现象。
血清蛋白质合成增加。大多发生在