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多环芳烃、多氯联苯优良降解菌的分离鉴定及降解特性研究.pdf

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多环芳烃、多氯联苯优良降解菌的分离鉴定及降解特性研究.pdf

上传人:kh6797 2016/8/22 文件大小:7.19 MB

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文档介绍:山东大’学博十学伉论文中文摘要作为持久性有机污染物(anicpollutants,POPs)的典型代表, 多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)和多***联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs)的分析方法、环境影响及其污染修复技术是目前国内外热点研究领域,生物降解特别是微生物降解被认为是去除环境中PAHs、PCBs的主要途径。本文在全面综述国内外相关研究的基础上,通过调查和监测选择并确定了PAHs、PCBs污染的土壤样品,筛选得到的一株可以高效降解PAHs、PCBs 的菌株,基于形态学特征、生理生化试验、细胞化学成分鉴定及16S rDNA序列比对分析等手段,鉴定该菌株属于两面神菌属(Janibacter sp.),命名为JYll。以此为基础,系统研究了JYll对PAHs、PCBs的降解效果和影响因素以及与 JYl6联合降解效率,并借助气相色谱一质谱联用技术对降解中间产物的定性分析,初步探讨了该菌株对菲、芘、苯并(口)芘和 PCBl8、PCB77的代谢途径。论文主要研究内容和结果如下: (1)采用索氏提取、超声提取及超临界C02提取三种样品前处理技术,,研究获得了济南炼油厂及胜利油田土壤中PAHs的污染特征。济南炼油厂土壤中检出全部16种PAHs,~ btg/kg; 胜利油田采油厂土壤中检出12种PAHs,- p,g/kg,两处土壤均在一定程度上受到了PAHs的污染。三种提取技术均有很好的提取效率和重现性,相对标准偏差(RSD%)小于5%(n=3),PAHs加标回收率为 %%,符合美国EPA标准中环境样品回收率(70%.140%)及RSD% (乜O%)的要求。(2)采用液液萃取、超声萃取及固相萃取等三种样品前处理技术,结合本实验室前期建立的PCBs分析方法, 分析技术。研究测定了废弃国产变压器油中类二嗯英类及阻转类PCBs的成分与含量,检出10种类二嗯英类PCBs(PCB77,81,105,114,118,123,126,156,167, 189)和4种阻转类PCBs(PCB45,95,132,149)。实验还结合Arcolor 1242标准品对变压器油中PCBs组分进行了分析,得至IJPCBs的分布特征:二***联苯含量为 %;三***%;四***%;五***和六***联苯含量为山东大学博}学位论文 %。由此可见,国产变压器油以三***联苯为主,高***代PCBs所占比例很少。三种提取方法的RSD%均小于5%(n=3),%~%, 符合美国EPA标准中回收率及相对标准偏差的要求。 、PCBs降解菌的分离与鉴定(1)PAHs、PCBs优势降解菌的分离。采集济南市炼油厂、胜利油田采油厂及原济南市变压器厂的土样,以菲、蒽、芘的混合样品为唯一碳源,采用定时定量转接、逐步提高碳源浓度的方法,共获得125个单菌落,经降解效率初步测定,选取降解能力较强的两株细菌JYll和JY3A进行鉴定研究。(2)JYll和JY3A的鉴定。通过形态特征描述,综合运用生理生化检测、脂肪酸分析、***萘醌分型及GC摩尔百分含量测定等方法,结合16S rDNA 序列分析、构建系统进化树,JY3A被认为属于Bacillus菌属的丑subtilis类群, 由于Bacillus菌属目前定名的复杂性和不确定性,尚需进一步PFGE和 。(3)JYl 1被鉴定为Janibacter菌属。该属1997年方予以命名,确定模式种为Janibacterlimosus,至今仅有5个种的报道。但JYll与该属模式种有较大差异,与其遗传距离最近的为Janibacter anophelis。细胞脂肪酸组成及含量分析结果表明,JYll在脂肪酸化学分类特征上表现出独特的菌株特异性,不同于 Janibacter limosus和Janibacteranophelis的已有报道。初步实验表明JYll在表现出良好的PAHs降解能力的同时,对PCBs亦有较好的降解能力,因此选择 JYll菌作为后续研究的出发菌株。 、PCBs的降解效果及影响因素研究(1)Janibacter ,Janibacter mgl PAHs的降解效果。结果表明,

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