文档介绍：猪蓝耳病抗体检测试剂盒
使用说明书
作I者：疾控科研试剂博客
联 I 系：I99I-4747-I94
版号：PRRS se!70510
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory
猪蓝耳病抗体检测试剂盒
使用说明书
作I者：疾控科研试剂博客
联 I 系：I99I-4747-I94
版号：PRRS se!70510
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory
Syndrome, PRRS ）病毒抗体检测试剂盒用于检测猪血清中的
PRRS抗体，评估养猪场PRRS疫苗免痕状况及感染猪的血清学
辅助诊断。本试剂盒对经典蓝耳病病毒和高致病性蓝耳病病毒
所产生的抗体都有很好的敏感性。
本试剂盒采用间接ELISA法，在酶标板条微孔上预包被纯化的
PRRS病毒抗原。在试验中，加入稀释后的待检血清，经过温育
后，若样品中含有PRRS病毒特异性抗体，则与包被板上的抗
原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标
二抗，与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗
涤除去未结合的酶标记物；在微孔中加入TMB底物液，经酶催
化形成蓝色产物，加入终止液终止反应后，用酶标仪450nm波
长测定反应孔中的吸光度A值。
1
抗原预包被板条
1/2块
7
阴性对照
2m 1
2
酶标记物
8
阳性对照
1. 6m 1
3
10倍浓缩洗涤液
100ml
9
血清稀释板
1/2块
4
显色液
11/22ml
10
封板膜
2/4张
5
样本稀释液
100ml
11
说明书
1份
6
终止液
15ml
需自备的设备及试剂
微量移液器：、io闵too闫、ioom-iooom0
—次性移液器吸头。
量筒：500mlo
96孔板酉每标仪。
蒸憎水或去离子水。
洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无浴血。
腕涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇动使结晶的盐
溶解，然后用蒸憎水或去离子水作I。倍稀释。稀释好的洗涤液可
在4C存放一周左右。
样品的稀释
在血清稀释板中按1: 50的体积比稀释待检血清。
注意：阴性和阳性对照不用稀释。取每个样品后都要更换吸头，
准确记录每个样品在板上的位置。每个样品在加入到包被板微孔
前应充分混匀。
I注意事项I
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，应将试剂盒各组份放置
室温至少1小肘以上。使用前应摇匀，使用后放回2-8°Co
不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂
时应防止试剂污染。
底物和终止液对皮肤和眼司能有刺激性，使用肘应该注意防
护。
TMB （显色液）不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
检测板拆封后应避免受潮或沾水（未用完的抗原包被板加干
燥剂放于自封袋中，并尽快置于2-8C）。
所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
产格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、
定时和洗涤等的全部过程必须精确。
血清稀释板为一次性用品，不得重复使用；血清稀