文档介绍：专业word可编辑
实验名称
(TitleofExperimetn)
蛋白质的定量测定(Folin-酚试剂法)
实验日期
(DateofExperiment)
XXXX
实验地点
(LabNo.)
XXXX
合作者
，具体绘制利用excel制
作，结果可见图2
(6)测样品蛋
白质含量
根据样品管(6管)的吸光度值，在标准曲线中找到
对应的蛋白质浓度，再乘以稀释倍数(3。。)，得出每毫升未稀释血清含蛋白质的微克数，即每毫升血清中蛋白质的微克数(mg/ml)。
血清蛋白浓度(%/ml)=样品蛋白质浓度x2X300
参考：正常人血清蛋白浓度范围为60~80g/L。
①试剂要求：实验所需的试剂必须是新鲜配制,不然会存在被空气及其他物质氧化还原的情况，干扰实验的测定。
②控制时间：Lowry反应的显色随时间/、断加深,因此各项操作必须精确控制时间。严格按照实验步骤的操作，规定的时间是多少就多少。水浴时间也不宜过长。同时，在最后从水浴加热后取出冷却后，需及时的进行比色测定。防止混合液中物质发生系列变化和反应。
③加入Folin-酚试剂后，需要马上混合摇匀，防止磷铝酸-磷鸨酸试剂被破坏。
④干扰物质的影响：凡干扰双缩月尿反应的基团，均可干扰Folin-酚反应。这些
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物质在所测样品中含量较高时，则需做校正曲线。若所测的样品中含硫酸俊，则需增加碳酸钠一氢氧化钠浓度即可显色测定。若样品酸度较高，也需提高碳酸钠一氢氧化钠浓度1—2倍，这样即可纠正显色后色浅的弊病。
⑤绘制曲线要求：作过原点的直线或光滑连续的曲线，该线表示实验点的平均变动情况，因此该线不需全部通过各点，但应尽量使未经过线上的实验点均匀分布在曲线或直线两侧。（电脑Excel绘图，可以不考虑）
⑥操作要按照实验步骤，一步一步来，防止操作问题导致的操作误差的出现
等。
二、实验记录
实验条件
材料及试剂：本次实验的试剂和材料均是实验室配制好的，比例和浓度同实验预<br****故不再赘述。
实验时间表：
总表
实验步骤
消耗时间
混合溶液
未计时
滴加溶液静置
10min
加Folin-酚试剂、水浴
10min
室温冷却
27min
等待
20min
比色测定
6min
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附表
项目时刻表
试管1
试管2
试管3
试管4
试管5
试管6
加硫酸铜
842”09
843”20
844”29
845”45
8'46”55
8'47”55
水浴
852”09
853”20
854”29
855”45
8'56”55
8'57”55
冷却等待
902”09
903”22
904”29
905”45
9'06”55
9'08”00
操作技巧：
①在这一次的实验中，关键的要点在于滴加Folin-酚试剂的摇匀，必须快速摇匀，保证反应优先进行。振荡试管时，振荡的正确方法是用手腕的力左右摆动，使试管中
液体混合均匀且不漏出。最后放入到水浴中加热。
②在分光比色的时候，测量一次后重新凋零，不能继续测量等。
操作失误：
全部实验过程中，就出现了一次失误，即在试管4加入Folin-酚试剂，充分摇匀，在放入水浴加热之间，部分液体由于磕碰而溅出。其余操作严格按照要求一步步完成，理论不存在着失误。
分析:Folin-酚与液体已经混合均匀并反应，在后面的水浴加热后，只是影响到了整体的试管4的反应后得到的溶液量，而不影响颜色的变化及最后的比色测定，故该失误不会对实验产生测定的偏差。
实验现象
①在滴加硫酸铜溶液后，摇匀，产生较多的黏性气泡且附着在液体表面。液体颜色变化不深。
②在滴加Folin-酚试剂水浴加热后，除试管1为淡黄色外，其余试管均成不同的蓝色。具体看下图：
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图一水浴后各试管的情况图
分析:标准液的试管中（2-5）蓝色不断加深，同实际的标准液的含量多少正相
关，而试管6的颜色不深，在1-2试管之间，根据实验原理初步可以判定的是：该样品液的蛋白质含量将不会在60-80g/L之间，而是在0-40g/L。即实验存在一定的问题，
详见结果的分析与讨论。
实验原始数据
本次实验原始数据是在500nm的波长下，各试管混合液的吸光度值，结果见下表1
表1500nm波长吸光度值记录
各管吸光度值A500测定次数
2
3
4
5
6
1
2
3
0.