文档介绍：动物微生物
血清学诊断
血清学试验
动物微生物
血清学试验的概念
由于抗体主要存在于血清中，所以将体外发生的抗原抗体结合反应称为血清学反应或血清学试验。
血清学试验
精品资料
你怎么称呼老师？
如果老师最后没显的沉淀或有沉淀的痕迹。
— ：液体不透明，呈均匀混浊，管底无凝集。有时有少量菌体集中于管底中心，呈脐状，但振摇时，立即散开呈均匀浑浊。
以出现“++”的最高血清稀释倍数即为该份血清的效价，又叫凝集价。大动物（马，牛，骆驼等）以凝集价1：100以上判为阳性，1：50的凝集价判为可疑。中小动物（猪，羊，狗等）以凝集价1：50以上判为阳性，1：25的凝集价判为可疑。
如对照管不符合要求时，试管须废弃重做。
血清学试验
动物微生物
间接凝集试验
概念：
将可溶性抗原或抗体与载体连接后，再与相应的抗体或抗原作用，所出现的特异性凝集反应为间接凝集试验。
类型：
间接血凝试验
乳胶凝集试验
协同凝集试验
血清学试验
动物微生物
致敏红细胞
红细胞
抗原
红细胞
抗原
致敏红细胞
被检抗体
红细胞凝集
间接血凝试验原理
血清学试验
血清学试验
凝集强度判定
＋ （100%红细胞凝集）：边缘不整齐，有红色颗粒布满孔底）
± （50%红细胞凝集）V型孔：孔底可见红色颗粒，中央有少量红细胞沉淀
－ 红细胞呈点状沉于孔底，无红色颗粒。
能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数，为该病毒的红细胞凝集滴度，即一个凝集单位。如表18-1-1的病毒血凝滴度为27，即将病毒原液作27倍稀释，其中含一个血凝单位的病毒。
由于病毒血凝抑制试验中需要的病毒液应含4个血凝单位，因此，需要对原病毒液进行25倍稀释。
血清学试验
以能使100%红细胞不发生凝集的血清最大稀释倍数为该血清的HI滴度，以2的指数表示。
血清学试验
动物微生物
沉淀试验的概念
可溶性抗原与相应的抗体结合，在适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀试验。
血清学试验
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沉淀试验的类型
环状沉淀试验
琼脂凝胶扩散试验
免疫电泳
血清学试验
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环状沉淀试验
方法：在***试管中进行。
原理：试管内，下层沉淀素与上层沉淀原在液界面应形成白色沉淀环。
用途：主要用于抗原的定性试验，如炭疽杆菌的Ascoli试验、链球菌的血清型鉴定、血迹鉴定等。
白色沉淀环
沉淀原
沉淀素
血清学试验
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琼脂凝胶扩散试验
原理
1%琼脂凝胶孔径为85nm，能使许多可溶性抗原与抗体在凝胶中扩散。当抗原与抗体在凝胶中的一定位置上相遇时，则两者结合形成沉淀线。
血清学试验
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琼脂凝胶扩散试验类型
单向单扩散
单向双扩散
双向单扩散
双向双扩散
方法
用途
血清学试验
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双向双扩散方法
此法系采用1%琼脂倒于平皿或玻片上，制成凝胶板，可按需要打孔。将抗原、抗体分别滴入孔内，放置湿盒中，在37˚C湿箱中24-72h后观察。
血清学试验
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双向双扩散用途
抗原的比较和鉴定：在抗原与抗体孔间形成沉淀带。每一种抗原成分出现一条沉淀带。如两个相邻孔之间抗原相同，则沉淀带融合，如1、2；抗原不同，则互相交叉，如3；部分相同则部分融合，另外不同部分则交叉，如4。
血清学试验
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免疫电泳
免疫电泳技术是把凝胶扩散试验与电泳技术相结合的免疫检测技术。即将琼脂扩散置于直流电场中进行，让电流来加速抗原与抗体的扩散并规定其扩散方向，在比例合适处形成可见的沉淀带。
血清学试验
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补体结合试验
试验系统、原理和结果判定
反应系统
已知抗原（抗体）
待检血清（抗原）
补体
绵羊红细胞
溶血素
如溶血则为阴性
如不溶血则为阳性
指示系统
反应结果的判定
血清学试验
动物微生物
血清学试验
动物微生物
中和试验
概念：根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验。
原理：病毒与抗血清中抗体特异结合后失去感染易感动物、鸡胚或细胞活性。
举例
IBDV 9～11d鸡胚 24～48h 鸡胚死亡
IBDV +抗血清 9～11d鸡胚 鸡胚不死亡
血清学试验
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免疫标记技术
抗原与抗体结合了，但复合物小，不能通过凝集或沉淀用肉眼观察到。
该怎么办？
将抗体或抗原联结在一个特定的易于检测的物质上，通过检