文档介绍：..... ..... 主要药效学研究四君子汤可以促进 MTL 的分泌,改善和促进胃肠动力,治疗脾胃气虚证。对面色萎白,语声低微,气短乏力,食少便溏,舌淡苔白,脉虚弱等均有疗效。(常用于慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡等属脾气虚者。) 研究资料中医认为脾的主要功能是“脾主运化”,脾失健运则机体的消化、吸收等功能减退,说明中医学“脾”的主要生理功能及病理表现与现代医学消化系统关系密切。观察消化道各部分消化功能及影响因素是研究中医“脾主运化”理论的重要组成部分。胃肠激素在调节胃肠道的消化吸收等活动中起着非常重要的作用, 胆囊收缩素(cholecysto-kinin, CCK) 、胃动素(motilin, MTL) 与动物的胃肠运动功能密切相关。但目前的相关文献多局限于胃肠运动或胃肠激素的单方面研究,对胃肠道消化功能的多层面研究较少。因此,笔者等以利血平建立大鼠脾虚模型,检测胃肌电活动和胃肠运动的变化,以及胃和小肠内CCK和MTL蛋白含量的变化,探讨健脾补虚经典方剂四君子汤对脾虚大鼠消化运动功能的影响。 1 材料与方法 药品及主要试剂仪器健康雄性SD大鼠36只(体重290 ±20g), 北京维通利华实验动物技术有限公司提供。利血平注射液(1mg/mL, 批号 090409) 购自广东邦民制药厂有限公司;四君子汤颗粒(批号 080301) 购自湖北武当生物制药有限公司;羧甲基纤维素钠购自 sigma 公司;速眠新Ⅱ购自军需大学兽医研究所(批号 20080310); 蛋白提取试剂盒、蛋白 BCA 法测定试剂盒购自南京凯基生物科技有限公司;CCK 、 MTLELISA 测定试剂盒购自 R&B 公司;生物医学信号采集处理系统(Pclab-UE, China); 超低温冰箱(SANYO, Japan); 680 型酶标仪(BIO-RAD, USA) 。 动物分组和模型处理供试大鼠适应性饲养 3d(每天给予充足的饲料和饮水),随机分为 3组:对照组、脾虚组和治疗组。脾虚组、治疗组腹腔注射利血平 0. 5mg/kg ·d[1], 对照组腹腔注射相应剂量的生理盐水;同时,四君子汤治疗组灌服四君子汤 8mL/kg ·d(剂量根据人和大鼠体表面积换算,约合生药 g/mL), 对照组和四君子护康颗粒剂资料 20号 1 脾虚组灌服相应剂量的生理盐水,连续 7d。每天观测大鼠临床表现,于试验 0、8、15 d测定各组大鼠体重变化。 胃排空率的测定取羧甲基纤维素钠 10g,溶于 250 mL蒸馏水中,加入奶粉 16g,糖8g,淀粉 8g, 活性炭 3g,搅拌均匀最后制成约 300 mL营养性半固体糊,冰箱冷藏,用前 2h取出, 恢复至室温。试验 14d,禁食 24h,每组随机取 4只大鼠按 10mL/kg 营养性半固体糊灌胃,灌胃前称定营养性半固体糊重量。 30min 后断颈法处死大鼠,剖腹取全部胃肠, 自幽门切迹处取胃,拭干称重,沿胃大弯剪开胃体,洗去胃内容物后拭干,称净重。计算胃排空率(%)=〔1-( 胃全重-胃净重)÷营养性半固体糊重量〕×100 。 肠推进功能测定自盲肠处取上述大鼠的全肠,不加牵拉铺平于白纸上,分别量取自幽门括约肌至营养性半固体糊最前端(营养性半固体糊移动距离)及至盲肠(幽-盲全长)的距离。计算肠推进比(%)=(营养性半固体糊移动距离÷幽-盲全长)×100 。 胃窦肌电测定试验 15d,从每组剩余大鼠中随机取 4只,速眠新Ⅱ按1mL/kg 肌肉注射麻醉后, 仰卧保定,打开腹腔,将一对正负电极(间距 ) 置于胃窦浆膜下,接地电极置于左下肢骨骼肌内。在麻醉状态下记录胃肌电变化,每次记录 30min, 计算机采集胃肌电波形及频率的变化。 胃肠道组织 K和 MTL 蛋白含量变化试验15d,将每组剩余 4只大鼠断颈处死,浸入 75% 酒精 3-5 次,取出置于无菌容器中。在无菌条件下取出胃和小肠,立即用生理盐水冲洗干净,分别取胃窦(从胃幽门至胃小旁角切迹处取胃窦腹侧壁全层组织)、十二指肠(距离幽门口 5cm处)、空肠(距离幽门口 20cm) 、回肠(接近盲肠 15cm处),迅速置于液氮中,-80 ℃保存。提取试验各组大鼠胃窦、十二指肠、空肠和回肠中总蛋白,用BCA 法测定总蛋白含量,ELISA K 和MTL 含量,严格按试剂盒说明书操作。四君子护康颗粒剂资料 20号 2 统计处理用DPS7. 05统计软件,显著性分析采用方差分析,结果以平均值±标准差表示。 2 结果 临床症状脾虚组在注射利血平后第3天开始出现明显腹泻症状,第5天开始出现肛周污秽,消瘦, 被毛枯槁无光泽,精神萎靡、扎堆、拱背等症状。治疗组粪便基本成形,体重上升,无明显萎靡、扎堆、拱背症状,与脾虚组比较,