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藏羊DQB1基因RT―PCR扩增及序列分析.doc

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藏羊DQB1基因RT―PCR扩增及序列分析.doc

上传人:ying_zhiguo03 2016/9/3 文件大小:52 KB

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文档介绍

文档介绍:藏羊 DQB1 基因 RT―PCR 扩增及序列分析摘要:提取藏羊脾脏总 RNA ,设计 DQB1 基因引物并进行反转录,扩增产物测序后利用生物软件进行序列分析。结果表明,藏羊 DQB1 基因长度为 786 bp, 编码 261 个氨基酸。藏羊 DQB1 基因与参考美利奴羊 DQB1 基因、中国美利奴细毛羊 MHC Ⅱ抗原基因、山羊 DQB1 基因的核苷酸序列同源性依次为 % 、 % 、 % , 氨基酸序列同源性依次为 % 、 % 、 % 。关键词:藏羊; DQB1 基因; RT-PCR ;序列分析中图分类号: Q75 ; +3 文献标识码: A 文章编号: 0439-8114 ( 2015 ) 15-3784-02 DOI : - Abstract : Total RNA from spleen of Tibetan sheep was extracted and reverse transcribed , and primers of DQB1 gene were designed for PCR amplification. Moreover , the gene sequence was analyzed by DNAStar software after the PCR products was sequenced. The results showed that the length of DQB1 gene was 786 bp, encoding 261 amino acids , pared with DQB1 gene of Merino sheep , MHC Ⅱ antigen gene of Merino Fine-Wool sheep and DQB1 gene of goat , the nucleotide sequence homology of Tibetan sheep were % , % , % respectively , and the amino acid sequence homology were % , % , % respectively. Key words : Tibetan sheep ; DQB1 gene ; RT-PCR ; sequence analysis 藏羊是中国三大原始绵羊品种之一,青海是主产区,分为高原型、山谷型和欧拉型。藏系绵羊具有耐粗饲、抗病力强等优良种质特性[1] 。绵羊的主要组织相容性复合体( Major plex , MHC ) 是参与机体免疫应答的重要基因[2] ,分为Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类分子,其中 MHC Ⅱ类分子的 DRB和 DQB 基因编码产物在免疫系统中发挥重要的调控作用[3] 。 Sauermann 等[4] 研究表明 MHC-classII Mamu-DQB1 基因可以减缓猴免疫缺陷病毒( SIV ) 感染猕猴的速度。绵羊 MHC-DQB1 基因的遗传多态性与绵羊疾病相关, 如多浪羊基因单倍型 DQB1-DF 和 DQB1-DH 与包虫病的抗性相关[5] , MHC 在抗病育种