文档介绍：一、 色谱法的特点、分类(fēn lèi)和作用
俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置：
色谱原型装置，如图。
色谱法是一种分离技术，
试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不色谱仪（2）
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液相色谱仪（3）
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液相色谱仪（4）
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一、高效(ɡāo xiào)液相色谱法的特点
特点：高压、高效、高速
高沸点、热不稳定有机及生化(shēnɡ huà)试样的高效分离分析方法。
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二、流程(liúchéng)及主要部件
(liúchéng)
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(zhǔyào)部件
(1) 高压输液泵
主要部件之一，压力：150～350×105 Pa。
为了获得高柱效而使用粒度很小的固定(gùdìng)相（<10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性
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(2) 梯度(tī dù)淋洗装置
外梯度:
利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例(bǐlì)送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。
内梯度:
一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂(róngjì)按一定的比例抽入高压泵中混合。
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(3) 进样装置(zhuāngzhì)
流路中为高压力工作(gōngzuò)状态，
通常使用耐高压的六通阀进样装置，
其结构如图所示：
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(4) 高效(ɡāo xiào)分离柱
柱体为直型不锈钢管，内径(nèi jìnɡ)1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
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(5) 高效(ɡāo xiào)液相色谱检测器
紫外光度检测器（UV）：最小检测量10-9g·mL-1，对流量和温度的波动不敏感，可用于梯度(tī dù)洗脱。
最常用的检测器。
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光电二极管阵列(zhèn liè)检测器
光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速(kuài sù)处理，三维立体谱图，如图所示。
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三、影响(yǐngxiǎng)分离的因素
在高效液相色谱(sè pǔ)中, 速率方程中的分子扩散项B/U较小，可以忽略不计，而只有两项，即：
H = A + C u
故液相色谱(sè pǔ)H-u曲线与气相色谱(sè pǔ)的形状不同，如图所示：
影响分离的主要(zhǔyào)因素有流动相的流量、性质和极性。
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1. 影响分离(fēnlí)的因素——流速
cm/s时, H～u曲线是一段斜率(xiélǜ)不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
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2. 固定(gùdìng)相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样(yīyàng)。
选择合适的固定相，降低填料粒度可显著提高柱效，但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。
选择短柱、细内径提高分析速度；
研制高效柱填料是一活跃领域。
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3. 流动(liúdòng)相及流动(liúdòng)相的极性
（1）可显著改变组分分离状况的流动相选择在液相色谱(sè pǔ)中显得特别重要。 液相色谱(sè pǔ)的流动相又称为：淋洗液，洗脱剂。
（2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相液液色谱(sè pǔ)法，极性柱也称正相柱。
（3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称