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DNA粗提取与鉴定.ppt

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DNA粗提取与鉴定.ppt

文档介绍

文档介绍:专题五
DNA和蛋白质技术
课题1
DNA的粗提取与鉴定
一、根底知识
1、DNA的溶解性
高浓度NaCl溶液,DNA溶解度高,过滤除去不溶的杂质。
,DNA溶解度低,析出DNA,过滤除去专题五
DNA和蛋白质技术
课题1
DNA的粗提取与鉴定
一、根底知识
1、DNA的溶解性
高浓度NaCl溶液,DNA溶解度高,过滤除去不溶的杂质。
,DNA溶解度低,析出DNA,过滤除去可溶的杂质。
DNA不溶于酒精
细胞中的某些蛋白质那么溶于酒精
(1) 酶
(2) 高温
2、DNA的耐受性
蛋白酶水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
大多数蛋白质60-80℃变性,
DNA在80℃以上才会变性。
瓦解细胞膜,但对DNA无影响。
(3) 洗涤剂
一、根底知识
在沸水浴条件下,DNA遇二苯***呈现蓝色。
3、DNA的显色反响
DNA遇***绿呈现绿色。
一、根底知识
二、实验材料
动物材料:鸡血
三、实验步骤
1、破碎细胞,获取含DNA的滤液
植物材料:菜花
吸水涨破
细胞壁:研磨
细胞膜:洗涤剂
滤液中可能含有哪些细胞成分?
怎样进一步提取滤液中的DNA?
三、实验步骤
2、去除滤液中的杂质
利用DNA在NaCl溶液中溶解度。
利用酶的专一性。
利用温度的耐受性。
三、实验步骤
3、DNA的析出
怎样进一步纯化提取出的DNA?
纯的DNA应该是什么颜色?
利用DNA不能溶于酒精溶液,纯化出白色丝状的DNA。
三、实验步骤
4、DNA的鉴定


高浓度NaCl溶液
DNA粗提取物
二苯***试剂
现象
步骤 试管号
a ml
a ml
适量
——
b ml
b ml
沸水浴加热
溶液变蓝
溶液不变色
现用现配
试验管
对照管
1. 两次向盛有鸡血的烧杯中参加蒸馏水的作用是〔 〕
、冲洗样品
、降低NaCl浓度使DNA析出
、增大DNA溶解量