文档介绍：. .
An im 习 H u s b a n d 叮& V e te ri n 卿 M e d ie in e 20 10 V o l 4 2 N o 12
1 株禽源致病性大肠杆菌分离鉴定与相关特性的初步研究
’
刘华, , 占松鹤‘, 朱良强, , 祁克宗“, 彭开松,
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(1 安徽省动物疫病预防与控制中心, 安徽合肥
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2 安徽农业大学, 安徽合肥 2 3《兀旧l )
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摘要: 无菌采取病鸭肝脏, 进行病原菌的分离鉴定生化试验、毒力基因检测和动物毒力试验。结果: 致病菌为大肠杆菌, 至少携带有 5 种
毒力基因, 并且该菌对小白鼠和鸡有较强的致死性, 属于大肠杆菌强毒株, 与基因检测的结果相吻合。
关键词: 禽大肠杆菌; 分离鉴定; 毒力基因
. 一一
中图分类号: 5 8 5 2 6 文献标识码: B 文章编号: 0 52 9 巧1 3 0 (2 0 1 0 )1 2 0 6 4 0 3
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大肠杆菌病是由大肠杆菌某些血清型菌株引起的 1 4 细菌鉴定
一。, .
一类疾病的总称[ ’, 〕该病一年四季均可发生尤以挑取麦康凯琼脂平板菌落用 0 85 % 无菌生理盐
。、, .
冬季及夏季多发在临床上可表现为败血症气囊水稀释用比浊计测得相当于 0 S M cF arl an d 浊度的
、、、、、, ,
炎肝周炎心包炎脐炎关节炎脑炎等发病菌悬液接种至 R ap 记 ID 32 ,E 决速肠杆菌鉴定试剂条
, , , ,
率高死亡率高且因与其他呼吸道疾病如慢性呼吸(法国梅里埃公司产品) 37 ℃培养 4 h 用 AT B 细
。, 。
道病混合或并发感染而使死亡率升高随着养禽业的菌自动鉴定仪读取反应结果检索菌名
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迅速发展与高度集约化饲养大肠杆菌病已成为禽类 1 5 毒力基因检测
4 一 6 。
重要的疾病之一〔] 为了控制大肠杆菌在禽群中的据 G en B an k 收录的禽致病性大肠杆菌 P 型菌毛
, 、、
传播我们对送检的疑似大肠杆菌病例进行病原的分基因 p aP C 产气杆菌素基因 iuc D 温度敏感性血凝
, 、、、
离鉴定并对分离菌的培养特性毒力基因携带情素基因 ts h 铁抑制蛋白基因帅2 血清抗性蛋白基
、, , ,
况致病力及抗菌药物的敏感性进行了试验为有效因 is 的序列按照多重 PCR 引物设计原则应用
。. ,
防治禽大肠杆菌病提供了依据 Pri m er 5 0 引物设计软件选取目的基因中高度保守
, 。、-
区设计并合成 5 对特异性引物各引物序列 G en
1 材料与方法、
B a n k 登录号预期扩增片段长度及各引物的理论退
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1 1 病料来源火温度见表 1
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合肥市瑶海区某鸭场送检的疑似大肠杆菌病的挑取 E e o li 0 1 (2 4 9 ) 大肠杆菌参考株和
、。,
病死鸭若干只分离菌株的典型菌落分别接种于 3 m L L B 培养基
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1 2 细菌分离培养中 37 ℃ 2 0 0 “m in 振荡培养 lo h 1 2 0 0 0 9 离
、, , 。
无菌采集病鸭或死鸭的肝脏心血等组织接种