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K试剂盒使用方法.doc

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K试剂盒使用方法.doc

文档介绍

文档介绍:检测范围:
8pg/ml-200pg/ml
使用目的:

人胆囊收缩素 (CCK) 试剂盒使用方法
96T
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素 (CCK)
检测范围:
8pg/ml-200pg/ml
使用目的:

人胆囊收缩素 (CCK) 试剂盒使用方法
96T
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素 (CCK) 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素 (CCK) 水平。用纯化的人胆囊收缩
素(CCK) 抗体包被微孔板, 制成固相抗体, 往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素 (CCK) ,
再与 HRP 标记的胆囊收缩素 (CCK) 抗体结合, 形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物, 经过彻底洗
涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终
的黄色。 颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素 (CCK) 呈正相关。 用酶标仪在 450nm 波长下测定
吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素 (CCK) 浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml× 1 瓶 7 终止液 6ml ×1 瓶
2 酶标试剂 6ml × 1 瓶 8 标准品( 400pg/ml ) × 1 瓶
3 酶标包被板 12 孔× 8 条 9 标准品稀释液 × 1 瓶
4 样品稀释液 6ml × 1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂 A 液 6ml × 1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂 B 液 6ml × 1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释: 本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
200pg/ml
5 号标准品
150μl 的原倍标准品加入
150μl 标准品稀释液
100pg/ml
4 号标准品
150μl 的 5 号标准品加入
150μl 标准品稀释液
50pg/ml
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入
150μl 标准品稀释液
25pg/ml
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入
150μl 标准品稀释液

1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入
150μl 标准品稀释液
2.
加样: 分别设空白孔 (空白对照孔不加样品及酶标试剂,
其余各步操作相同) 、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样
50μl,待测样品孔中先加样品稀释液
40μl,
然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为
5 倍)。加样