文档介绍：实验三 细菌的芽孢染色
第1页，本讲稿共12页
实验目的
掌握芽孢染色法及芽孢形态
掌握印片染色法及插片观察放线菌的形态
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实验原理---芽孢染色
芽孢壁比营养细胞的细胞壁结构复杂而且致密，透性实验三 细菌的芽孢染色
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实验目的
掌握芽孢染色法及芽孢形态
掌握印片染色法及插片观察放线菌的形态
第2页，本讲稿共12页
实验原理---芽孢染色
芽孢壁比营养细胞的细胞壁结构复杂而且致密，透性低，着色和脱色较营养细胞难。采用碱性染料并在微火上加热，或延长染色时间，使菌体和芽孢同时染色后，用蒸馏水冲洗，脱去菌体颜色，保留芽孢的颜色。并用另一种对比鲜明的染料使菌体着色。
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实验原理---放线菌形态的观察
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实验器材
1、材料
枯草芽孢杆菌；吸水链孢霉；紫色直丝链孢霉
2、试剂
孔雀绿染液（5%），复红染液
3、其他
接种环、木夹、刀片等
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实验步骤---芽孢染色
（1）制片
（2）孔雀石绿染色 ：加孔雀绿染液覆盖涂片区,再用木夹夹住载玻片，在微火上加热，致蒸汽徐徐冒出，保持1min
（3） 冷却 、水洗、吸干
（4） 复红复染1~2min
（5） 水洗、吸干
（6） 镜检
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实验步骤---印片染色法观察吸水链孢霉
印片→微热固定→石炭酸复红染色
1min→水洗→晾干→镜检
印片：用解剖刀取放线菌培养体一块，将菌面朝上放在一载玻片上，另取一洁净载玻片置于火焰上微热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢子丝或孢子）粘附（“印”）在后一块载玻片的中央，有印迹的一面朝上，通过火焰2-3次固定；
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实验步骤---插片法观察紫色直丝链孢霉
用镊子轻轻取出紫色直丝链孢霉平皿中的盖玻片。
将盖玻片直接放在一块干净的载玻片上镜检。
效果如果不理想,可以用印片法观察紫色直丝链孢霉,方法同吸水链孢霉的观察.
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实验作业
绘出芽孢杆菌芽孢及菌体形态图;绘出吸水链孢
霉及紫色直丝链孢霉孢子及菌丝的形态。
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实验思考题
1．试比较两种观察放线菌方法的优缺点。 2．镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？
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