文档介绍：微生物指标
菌落总数
总大肠菌群
耐热大肠菌群
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一、菌落总数
——平皿计数法
:
菌落总数（standard plate-count bacteria）水样仪器：培养箱、平皿和试管等。
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①乳糖发酵试验
取1mL水样接种到10mL双料乳糖蛋白胨培养液中，取1mL水样接种到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1mL水样注入9mL灭菌生理盐水中，混匀后吸收1mL（）注入到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。
对已处理过出厂自来水，需经常检验或天天检验一次，可直接接种5份10mL水样双料培养基，每份接种10mL水样。
检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，，， ，，每个稀释度接种5管，每个水样共接种15管。接种1mL以下水样时，必须作10倍递增稀释后，取1mL接种，每递增稀释一次，换用1支1mL灭菌刻度吸管。
接种管置36 ℃+1 ℃培养箱内，培养24h+2h后,如全部乳糖蛋白胨培养管都不产酸产气，则可汇报为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按以下步骤进行。
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分离培养
将产酸产气发酵管分别转钟在伊红美兰琼脂平板上，于36 ℃+1 ℃培养箱内培养18h～24h，观察菌落形态，挑取符合以下特征菌落作革兰染色、镜检和证实试验。
深紫黑色、含有金属光泽菌落；
紫黑色、不带或略带金属光泽菌落；
淡紫红色、中心较深菌落
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证实试验
经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌，同时接种乳糖蛋白胨培养液，置36 ℃+1 ℃培养箱内培养24 h+2h,有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。
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查表
依据证实为总大肠菌群阳性管数，查MPN（most probable number,最可能数）检索表，汇报每100mL水样中总大肠菌群最可能数（MPN）值。5管法结果见表2,。如全部乳糖发酵管均为阴性时，可汇报总大肠菌群未检出。（表3略）
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表2 用5份10mL水样时各种阳性和阴性结果组合时最可能数（MPN）
5个10mL管中阳性管数
最可能数（MPN）
0
＜
1
2
3
4
5
＞16
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三、耐热大肠菌群
——多管发酵法（另有滤膜法）
耐热大肠菌群（thermotolerant coliform bacteria）用提升培养温度方法将自然环境汇中大肠菌群与粪便中大肠菌群区分开， ℃仍能生长大肠菌群，称为耐热大肠菌群。
：EC培养基和伊红美兰琼脂
：恒温水浴培养箱
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自总大肠菌群乳糖发酵试验中阳性管（产酸产气）中取1滴转钟于EC培养基中， ℃水浴箱或隔水式恒温培养箱内（水浴箱水面应高于试管中培养液面），培养24 h+2h后，如全部管均不产气，则可汇报为阴性，如有产气者，则转钟于伊红美兰琼脂平板上， ℃培养18h～24h，凡平板上有经典菌落者，则证实为耐热大肠菌群阳性。
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如检测未经氯化消毒水，且只想检测耐热大肠菌群时，或调查水源水耐热大肠菌污染时，可直接多管耐热大肠菌群方法， ℃ + ℃水浴中培养。
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依据证实为耐热大肠菌群阳性管数，查最可能数（MPN）检索表，汇报每100mL水样中耐热大肠菌群最可能值。
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耐热大肠菌群卫生学意义
作为一个卫生指标菌，耐热大肠菌群中很可能含有粪源微生物，所以耐热大肠菌群存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。不过，耐热大肠菌群存在并不代表对人有什么直接危害。
通常情况下耐热大肠菌群与总大肠菌群相比，在人和动物粪便中所占百分比较大，而且因为在自然界轻易死亡等原因，耐热大肠菌群存在可认为近期水体直接或间接地受到了粪便污染。