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文档介绍

文档介绍:-
. z.
(1) 提取液的制备
常 z.
取适量样品,按第二节中的原则对样品进展提取,提取液移入250 ml容量瓶中,慢慢参加5 ml乙酸锌的溶液和5ml亚铁***化钾溶液,加水至刻度,摇匀后静至30分钟。用枯燥滤纸过滤,弃初滤液,收集滤液备用。
② 碱性酒石酸铜溶液的标定
准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于250ml锥形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒。
② 碱性酒石酸铜溶液的标定
准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于250ml锥形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒。
从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液,加热使其在2分钟内沸腾,准确沸腾30秒,趁热以每2秒一滴的速度滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好图褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次,取其平均值。
F = c • V
式中:F--------10mg碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量,mg;
C-------葡萄糖标准溶液的浓度,mg/ml;
V---------标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积,ml。
③ 样品溶液预测
吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各 5 ml,置于250ml锥形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒。加热使其在2分钟内沸腾,准确沸腾30秒钟,趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液,须始终保持溶液的沸腾状态,待溶液蓝色变浅时,趁热以每2秒一滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗溶液的体积。
④ 样品溶液测定
吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于250ml锥形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒。从滴定管参加比预测时样品溶液消耗总体积少
-
. z.
1ml的样品液,使其在2分钟内加热至沸,准确沸腾30秒钟,趁热以每2秒一滴的速度继续滴定,直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品液的体积。平行操作3次,取其平均值
(5)结果计算
复原糖〔以葡萄糖计%〕
式中:m-----样品质量, g;
F------10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量,mg;
V------测定时平均消耗样品溶液的体积,ml;
250------样品溶液的总体积,ml。
(6) 说明与讨论
①醋酸锌及亚铁***化钾作为蛋白质沉淀剂这两种试剂混合形成白色的***亚铁酸锌沉淀,能使溶液中的蛋白质共同沉淀下来。
②此法所用的氧化剂碱性酒石酸铜的氧化能力较强,醛糖和***糖都可被氧化,所以测得的是总复原糖量。
③本法是根据一定量的碱性酒石酸铜溶液〔Cu 2 +量一定〕消耗的样液来计算样液中复原糖含量,反响体系中Cu 2 + 的含量是定量的根底,所以在样品处理时,不能用铜盐作为澄清剂,以免样液中引入Cu 2 + ,得到错误的结果。
④ 次***蓝也是一种氧化剂,但在测定条件下氧化能力比Cu 2 +弱,故复原糖先与Cu 2 + 反响, Cu 2 +完全反响后,稍过量的复原糖才与次***蓝指示剂反响,使之由蓝色变为无色,指示到达终点。
⑤为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰,在碱性酒石酸铜乙液中参加少量亚铁***化钾,使之与Cu2O生成可溶性的无色络合物,而不再析出红色沉淀,其反响如下:
-
. z.
Cu2O + K4Fe() +H2O=K2Cu2Fe()6 +2KOH
⑥碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存,用时才混合,否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度降低。
⑦ 滴定必须在沸腾条件下进展
原因:一是可以加快复原糖与的反响速度;二是次***蓝变色反响是可逆的,复原型次***蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外,氧化亚铜也极不稳定,易被空气中氧所氧化。
保持反响液沸腾可防止空气进入,防止次***蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。
⑦ 滴定必须在沸腾条件下进展