文档介绍：白喉杆菌
结核杆菌
芽胞杆菌
Date
1
.
实验目的：
通过感性认识，加深对白喉杆菌、结核杆菌、芽胞杆菌生物学性状的印象和记忆。
通过实验掌握两种染色法。
Date
2
.
白喉杆菌实验内容：
（一） 观察
白喉杆菌
结核杆菌
芽胞杆菌
Date
1
.
实验目的：
通过感性认识，加深对白喉杆菌、结核杆菌、芽胞杆菌生物学性状的印象和记忆。
通过实验掌握两种染色法。
Date
2
.
白喉杆菌实验内容：
（一） 观察白喉杆菌的形态（阿尔伯染色)
（二）观察白喉杆菌在吕氏血清斜面上和亚碲酸钾培养基上的生长情况 （示教）
（三）观察白喉杆菌毒力试验（示教）
Date
4
.
实验材料：
阿尔伯（Albert）染色
材料：
接种环、酒精灯、生理盐水
玻片 1片/人
白喉杆菌的吕氏血清斜面培养物 1支/2人
阿尔伯染色液 1套/2人
染色缸，染色架，胶瓶 1套/2人
吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸
Date
5
.
（一）阿尔伯（Albert）染色实验方法：
步骤
涂片→
干燥固定→
阿尔伯“甲液”染7-10分钟后水洗→
阿尔伯“乙液”染1分钟后水洗
（将观察结果绘图）
Date
6
.
Date
7
.
（二）观察白喉杆菌的生长情况 （示教）
亚碲酸钾培养基
吕氏血清斜面
亚碲酸钾培养基
吕氏血清斜面
Date
8
.
（三）观察白喉杆菌毒力试验（示教）
平板毒力试验（Elek平碟法）
白喉外***
原理：***抗***中和(双向琼脂扩散)
Date
9
.
白喉杆菌毒力试验（Elek平碟法）
Date
10
.
二、结核杆菌
（一）抗酸染色法 (复染法) （二）观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况（示教）
Date
11
.
抗酸染色法原理
抗酸性菌体内含脂类物质较多，如结核杆菌（脂质占菌体干重的20～40%，占胞壁干重的60%）体内含有分枝菌酸（脂类），此物质具有抗酸的性质。染色时，它与石炭酸复红结合牢固，能抵抗酸性酒精的脱色作用，同时脂类又不易透过细胞膜，不能被脱色，因此抗酸菌能保持复红的颜色。相反，非抗酸性菌体内含脂类少，易被酸性酒精脱色，脱色时又易从细胞膜渗出而脱掉，最后被复染成蓝色。
Date
12
.
（一）抗酸染色法 (复染法)
步骤：
取痰涂片1片→
固定→
石炭酸复红染7—10分钟后水洗→
3%盐酸酒精脱色3—5秒，重复3次，然后水洗→
碱性美蓝复染2分钟后水洗→
自干或用吸水纸吸干，然后在油镜下观察结核杆菌的形态、排列及染***。
（将观察结果绘图）
Date
13
.
（二）观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况（示教）
Date
14
.
三、芽胞杆菌 (G+)
（一）观察炭疽杆菌的形态和菌落特点（示教）
（二）观察产气荚膜杆菌的形态和生长特点 （示教）
Date
15
.
（一）观察炭疽杆菌的形态和菌落特点（示教）
形态：
致病菌中最大的细菌
菌体粗大，两端平截或凹陷。
竹节状排列
革兰氏染色阳性
芽胞
荚膜
Date
16
.
炭疽杆菌
Date
17
.
（二）观察产气荚膜杆菌的形态和生长特点 （示教）
形态
(复****br/>生长特点
汹涌发酵现象
Date
19
.
汹涌发酵现象
在牛乳培养基中分解乳糖，产酸使酪蛋白凝固；产生大量气体，将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，甚至冲开管口棉塞，气势汹猛。
Date
21
.
1、显微镜（油镜）的使用和保护方法
（1）提供一张细菌玻片标本，要求能正确使用油镜观察到细菌的基本形态；
（2）掌握显微镜（油镜）的保护方法
2、血清对倍稀释法
（1）用生理盐水将血清进行对倍稀释，终浓度达到1/2，1/4,1/8三个稀释度；
（2）掌握血清对倍稀释的原理和方法，能正确使用刻度吸管。
3、玻片凝集试验
（1）要求用伤寒诊断血清，采用玻片凝集试验的方法检测待检细菌是否为伤寒杆菌；
（2）要求操作方法、步骤正确，能准确判断结果；
（3）无菌操作正确。
4 、革兰染色法
（1）口试回答细菌涂片的制作方法；
（2）将一张已涂好的细菌玻片进行革兰氏染色；
（3）要求染色步骤及各项染色时间正确，操作熟练。
5、细菌划线分离培养技术
（1) 将细菌分区划线到普通