文档介绍：生物选修3基因工程知识点归纳详实
什么是基因？
什么是有遗传效应？
基因的功能是什么？
有遗传效应的DN***段
能够直接指导或间接调控蛋白质合成
基因能够储存、______和_______遗传信息，也可能发生突变，从而决定生
蛋白质
蛋白质
双链DN***段
将单个脱氧核苷酸
合成互补子链
不需要
需要
构建基因表达载体
PCR技术需要耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶
连接滞后链上的
冈崎片段
将游离脱氧核苷酸连接到引物，形成互补子链
DNA连接酶和DNA聚合酶有何区别？
能否把目的基因直接导入受体细胞？需要什么工具？
载体的作用是什么？
载体的化学本质是什么？
天然的DNA分子可以直接用做基因工程的载体吗？
载体需要具备什么条件？
作为运载工具，将外源基因转移到受体细胞中去；
使外源基因能在受体细胞内稳定保存、复制和表达。
本质是能够自我复制的DNA分子
对受体细胞______；
能在受体细胞中______并稳定保存；
具有___________________的切点，供外源基因插入；
具有__________，供重组DNA的鉴定和筛选。
无害
复制
一种至多种限制酶
标记基因
基因工程使用的载体有哪些？
什么是质粒？
质粒存在于哪些生物的细胞中？
携带外源基因的质粒进入受体细胞，有几种复制方式？
质粒DNA分子上有哪些标记基因？
①质粒；②动植物病毒；③λ噬菌体的衍生物
细菌拟核DNA之外，能够进行自主复制的小型双链环状DNA分子
细菌和酵母菌
能在受体细胞进行自我复制；
或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。
四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等
不经改造的普通噬菌体，能否用做基因工程的载体？
普通的噬菌体进入细菌细胞，会导致受体菌裂解死亡
基因工程的基本操作程序
基因工程的基本操作程序，包括哪几个步骤？
目的基因的获取；
基因表达载体的构建；
将目的基因导入受体细胞；
目的基因的检测和鉴定。
什么是目的基因？
从供体细胞转移到受体细胞的基因。主要指的是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的基因。
获取目的基因的常用方法有哪些？
从基因文库中获取目的基因；
利用PCR技术扩增目的基因；
通过DNA合成仪，用化学方法人工合成。
什么是基因文库？
基因文库有几种类型？
将含有某种生物不同基因的许多DN***段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。
基因组文库：
部分基因文库：
只包含了一种生物的部分基因，如：cDNA文库
受体菌群含有一种生物的全部基因
某种生物的基因组文库有几个？cDNA文库呢？
基因文库的构建方法是什么？
一种生物的基因组文库只有一个，而cDNA文库可以有多个
提取某种生物的全部DNA
限制酶切割
一定大小的DN***段
与载体连接
导入受体菌中储存
基因组文库
某种生物的mRNA
单链互补DNA
双链cDN***段
导入受体菌中储存
与载体连接
cDNA文库
逆转录酶
编码区
非编码区
非编码区
DNA聚合酶
剪接有关的酶
RNA聚合酶
mRNA前体
mRNA
单链DNA
cDNA
逆转录酶
转录
剪接
逆转录
复制
启动子
终止子
基因
真核细胞的cDNA的获取
不含非编码序列，即不含启动子、终止子和内含子
构建基因文库，需要哪些操作工具？
从基因文库中提取目的基因时，还需要用上述工具吗？
怎样从基因文库中得到所需要的目的基因？
得到目的基因之后，怎样在短时间内大量扩增目的基因？
什么是PCR技术？
限制酶、DNA连接酶、载体
不需要
根据目的基因的有关信息，如基因的功能、转录产物等进行筛选
PCR技术
PCR全称为________________，是一项在生物______复制_____________的核酸合成技术。
聚合酶链式反应
体外
特定DN***段
PCR技术的理论基础（原理）是什么？
进行PCR时，怎样使DNA双链解开？
体外模拟细胞内的DNA复制
利用DNA的热变性原理
在80℃-100℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开
高温解决了打开双链的问题，但怎样解决DNA聚合酶失活的问题？
DNA聚合酶的作用有何特点？
引物是怎样合成的？起什么作用？
复制含目的基因的双链DN***段需要几种引物？
需要一种耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶（70℃-75℃）
不能从头合