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小鼠脱氢表雄酮DHEA酶联免疫分析.docx

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小鼠脱氢表雄酮DHEA酶联免疫分析.docx

上传人:小雄 2022/2/14 文件大小:108 KB

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文档介绍

文档介绍:小鼠脱氢表雄***(DHEA)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
lnmol/L -40 nmol/L
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中脱氢表雄***(DHEA)含量。
小鼠脱氢表雄***(DHEA)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
lnmol/L -40 nmol/L
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中脱氢表雄***(DHEA)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脱氢表雄***(DHEA)水平。用纯化的小鼠脱 氢表雄***(DHEA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脱氢表雄 ***(DHEA),再与HRP标记的脱氢表雄***(DHEA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物, 经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下 转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脱氢表雄***(DHEA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠脱氢表雄***(DHEA)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml X 1 瓶
7
终止液
6mlX 1 瓶
2
i®标试剂
6ml X 1 瓶
8
标准品(80 nmol/L )
XI瓶
3】
海标包被板
12孔X 8条
9
标准品稀释液
X 1 瓶
4 >
羊品稀释液
6ml X 1 瓶
io i
搠书
1份
5
洛色剂A液
6mlX 1 瓶
11圭
寸板膜
2张
6
艮色剂B液
6mlXl/ 瓶
12 S
S封袋
1个
标本要求
标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融
不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
40 nmol/L
5号标准品
150四1的原倍标准品加入150四1标准品稀释液
20 nmol/L
4号标准品
150|11的5号标准品加入150四1标准品稀释液
10 nmol/L
3号标准品
150四1的4号标准品加入150四1标准品稀释液
5 nmol/L
2号标准品
150|11的3号标准品加入150四1标准品稀释液
nmol/L
1号标准品
150|11的2号标准品加入150四1标准品稀释液
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样
50四1,待测样品孔中先加样品稀释液40四1, 然后再加待测样品10^1 (样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37°C温育30分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馅水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。
加酶:每孔