文档介绍：实验室练****6:数据定量分析在这个实验中,您将建立具有三个浓度级别的校正数据库,并将其保存为方法的一部分。该方法用于未知物的定量计算。在这个实验中:?获取所需信息以设置校正方法?建立一个5个浓度级别的含内标的校正数据库?定量一个未知化合物对以下化合物进行定量:实验室练****6:数据定量分析积分70内标目标化合物TributylphosphateAcetamide,N-phenylphenacetincaffein积分精确定量的重要因素之一是正确积分。1)通过选择File/LoadDataFile…调用C:\MSDCHEM\1\DATA\VOADATA\,选择Method/LoadMethod…。2)选择Chromatogram/SelectIntegrator及RTEIntegrator单击OK。OK对积分来说只是临时选择。现在让我们对caffein设定积分参数。3)选择Chromatogram/ExtractIonChromatograms…完成图1所示的需要输入的项目(注意时间范围)单击OK。NOTICE图14)现在编辑RTE的缺省积分参数。选择Chromatogram/MSSignalIntegrationParameters…完成图2所示的要输入的项目。须知当欲在最小峰面积(minimumpeakarea)中添入大于100的数之前必须选中AreaCounts选项框。实验室练****6:数据定量分析积分72NOTICE图25)单击OK接受所做的改变。现在通过选择Chromatogram/Integrate用这些参数做积分。注意离子194被积分,而离子67没有被积分。让我们降低最小面积来解决这一问题。6)选择Chromatogram/MSSignalIntegrationParameters…完成图3中所示的各项内容。NOTICE图37)单击Save…,单击OK。图48)在积分参数框中单击OK返回离子质量色谱。在Chromatogram/Integrate用降低后的最小峰面积参数做积分。注意此时离子67和194都被积分了。现在我们建立并保存了积分参数,它将被用于定量数据库。9)选择Chromatogram/DrawChromatogram查看当前数据文件的TIC图。实验室练****6:数据定量分析积分74建立校正曲线:无论SCAN和SIM方式,用提取离子质量色谱做校正和定量比用总离子流色谱峰要好,因为能提高信噪比。用提取离子定量比用TIC精度更高。TIC则用于开始设置校正参数时确定保留时间。1)选择Calibrate/SetUpQuantitation...。2)QuantitationDatabaseGlobals对话框会显示出来。完成图5中所需填入的内容。NOTICE图5注意标有NOTICE处用了RTE积分参数文件。3)完成后单击OK。pounds框(图6)会显示出来:图64)单击InsertAbove,图7会显示出来:图7注意:必须首先输入内标。所有在内标之后输入的化合物都用它定量,直到遇到下一个内标。5)将7-13分钟范围内的色谱图放大在窗口中。。在屏幕上会出现什么信息?_______________________________________________________________注意保留时间(箭头在X轴的位置)被填写在QuantSetup窗口。同时所指定保留时间的质谱显示在窗口1。实验室练****6:数据定量分析积分766)输入化合物名称。填入化合物名称。。注意如果使用氘代内标时区分定量,化合物是靠信号而不是保留时间,因为内标和要定量的化合物共流出,因此峰会重叠。ISTD选项被选中。7)将箭头移到窗口将箭头放在M/Z93上同时击鼠标左右键。会发生什么?_______________________________________________________________8)用同样方法输入一个或几个特征离子。对于Tributylphosphate,特征离子是135。9)全部输入之后,在QuantSetup窗口底部击Save键。这就完成了需要在定量数据库中添加单个化合物的任务。10)重复以上步骤,把表1中每个化合物输入定量数据库。(注意Tributylphosphate已经输入了。)、211Acetamide,N-、179、