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文档介绍:食品中苏丹红食品中苏丹红II的的免疫学快速检测方法研究免疫学快速检测方法研究?******@1前言苏丹红I(1-苯基偶氮-2-萘酚),属于苏丹红染料的一种,作为化学合成染料,主要应用于鞋油、化妆品等工业产品及其他着色剂等领域。苏丹红I在体内代谢,可被还原为初级代谢产物苯胺和1-氨基-2-萘酚,这些物质会攻击肝细胞,引起中毒性肝病,也可造成神经系统损害,是一种遗传毒性致癌物。苏丹红I2前言-苏丹红I检测现状?目前食品中苏丹红I的检测主要辅助仪器(HPLC、、IAS-HPLC)进行检测,而仪器检测方法普遍存在的缺陷在于:1. 检测仪器昂贵2. 检测成本高3. 操作复杂4. 耗时长5. 需专业人员操作6. 不适宜现场抽查及推广应用免疫学检测技术解决食品中苏丹红I快速检测的问题!3一. 研究内容苏丹红I多抗制备及鉴定研究内容苏丹红I免疫学检测方法建立间接竞争ELISA方法胶体金免疫层析试纸条法41. 苏丹红I多克隆抗体的制备苏丹红I多克隆抗体的纯化及含量测定苏丹红I多克隆抗体的制备苏丹红I衍生物-明胶免疫抗原的合成苏丹红I多抗制备5免疫原的制备:①利用重氮法合成带有羧基的苏丹红I衍生物②利用混合酸酐法合成苏丹红I-明胶复合物对氨基苯甲酸 2-萘酚苏丹红I衍生物苏丹红I衍生物明胶苏丹红I衍生物-明胶 苏丹红I免疫原的制备6首次免疫: mL完全弗氏佐剂+ mL 2 mg/mL免疫原, 于兔背部注射。2 周后: mL不完全弗氏佐剂+ mL 2 mg/mL免疫原,足掌注射。每隔10天: ,加强免疫3次。最后一次免疫后的7~10天试血。 苏丹红I多抗的制备选择体重2 kg的雄性新西兰兔,按照常规免疫程序,制备多克隆抗体。整个免疫过程为2~3个月。7 苏丹红I衍生物的合成结果苏丹红I衍生物红外图谱鉴定a- 苏丹红Ib- 衍生物b曲线在1700cm-1处存在较强的吸收峰表明反应产物的结构上基本连接羰基。 苏丹红I衍生物的色谱分析结果10