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文档介绍

文档介绍:Code No. 3340
研究用
Chaperone Plasmid Set
说明书

r for in vitro diagnosis.● 制品说明
蛋白质的结构和功能分析是后基因组学领域面临的挑战之一,现已受到广泛关注。表达的大量重组蛋白质
需要对其结构和功能进行测定,为了满足这一需求,便开发了多种表达系统。
大肠杆菌由于系统简单,在表达系统的选择上范围广泛,因此通常被用作蛋白质表达的宿主菌。但是,外
源蛋白质在 中表达时,常常出现表达的蛋白质形成包涵体或被蛋白酶降解的情况,原因大多是表达的
蛋白质没能进行正确的折叠,这不利于研究蛋白质功能。
已证实,分子伴侣(Molecular Chaperones)或称伴侣蛋白参与蛋白质的折叠过程。为探究蛋白质的体内折
叠机理,已投入了大量的研究工作。HSP Research Institute, 。
本 Chaperone Plasmid Set 含有五种类型的质粒,每一种质粒都能有效表达不同类型的伴侣蛋白组,各伴
侣蛋白组协同作用、共同参与蛋白质折叠。据报道,目的蛋白质与其中一种“Chaperone team”共同表达,
便可增加可溶性蛋白质的回收率,而使用通常方法,由于包涵体的形成,这些表达蛋白质常常是不可回收
的(参见图 1)。





















图 1. 伴侣蛋白对胞内蛋白质合成体系的作用(摘自文献 1)。
〈可使用大肠杆菌表达体系〉
伴侣蛋白质粒含有 pACYC 的复制起点和氯霉素抗性基因(Cmr 基因),通常应用在大肠杆菌表达体系中,
与 ColE1 型、具有氨苄抗性(Ampr)筛选标记的表达载体共存。各伴侣蛋白质基因位于 araB 启动子或 Pzt-1
(tet)启动子下游,而目的基因处于 lac 或其它启动子的控制之下,目的蛋白质与伴侣蛋白可分别诱导表
达。另外,质粒上也具备启动子必要的元件(araC 或 tetR)。需注意的是该伴侣蛋白质粒不可以与含有氯
霉素抗性基因的表达质粒共同使用。例如,常用的 pET 系列载体等可以使用 BL21(DE3)作为宿主,
却不可以使用 BL21(DE3) pLysS 和 BL21(D

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