文档介绍：液相色谱
高效液相色谱使用维护注意事项及常见问题排除
现象判断排除方法
(1) 柱端过滤器堵塞(1) 拆下过滤器用稀硝酸超声清洗
柱压高于正常值(2) 长期使用柱端固定相板结,塌陷(2) 挖掉板结部分修补柱端或更换色谱柱
(3) 分析生化、染料等易污染固定相的样品导致柱污染(3) 采用保护柱
柱压低于正常值某连接处泄漏高压查找泄漏处,连接处更换密封刃环
(1) 色谱柱老化(1) 柱再生或换柱
塔板数下降
(2) 柱被污染(2) 依色谱柱说明书清洗
(1) 检测器选择不当,样品无吸收(1) 正确选择检测器,如样品无吸收就不应选择UV检测
器,而应选其他检测器
进样后不出峰(2) 试样溶液浓度太低,而检测灵敏度不高(2) 适当提高样品浓度和进样量,提高检测灵敏度
(3) 检测器到色谱工作站之间的信号线连接处不好或断开(3) 修复接好信号线并将灵敏度调到适当的位置
(4) 进样用注射器堵塞或泄漏使样品溶液不能进入进样阀(4) 修理或更换注射器或进样阀
(1) 注射器泄漏(1) 更换新注射器
(2) 阀转子上针头密封垫磨损导致泄漏(2) 更换新的零件
进样不出峰或(3) 选用的注射器针头与进样阀不匹配(3) 更换合适的针管
者峰高不正常(4) 定子与转子接触密封面损坏引起内通道断路(4) 损坏不严重的转子重新研磨,使之恢复性能,否则
更换新的转子
(5) 定量管堵塞(5) 设法疏通,或更换定量环
(1) 进样阀或进样针污染(1) 清洗进样阀的样品通路和进样针
出现未知杂峰
(2) 流动相中有气泡流入检测器(2) 排出气泡,方法参照仪器说明书
(1) 定量管与进样阀连接处出现死体积(1) 更换新管消除死体积
(2) 进样器内有污染或不干净(2) 可先用2:l:4的硫酸-硝酸-水的混合溶液清洗接
着用蒸馏水洗净然后用丙酮或乙醚等溶剂清洗烘干
(3) 色谱柱选择不当,试样与固定相间有作用(3) 更换色谱拄
峰形拖尾
(4) 进样技术有误(4) 提高进样技术
(5) 样品在流动相中溶解度小(5) 选用对试样溶解能力强的溶剂作为流动相
(6) 进样量太大(6) 减少进样量
(7) 色谱柱与阀、检测器连接处出现死体积(7) 重新装柱或更换连接管路
(1) 柱端固定相板结(1) 挖掉修补,重填固定相
(2) 柱端床层塌陷(2) 修补柱床
(3) 柱子寿命已到(3) 更换新柱
分离度变差(4) 进样量过大(4) 减少进样量
(5) 样品浓度过大(5) 减小配样浓度
(6) 试样溶解不完全(6) 换溶剂使其完全溶解
(7) 色谱柱污染柱效下降(7) 更换柱子或用极性溶剂冲洗
(1) 更换流动相对旧流动相末完全被替换(1) 延长平衡时间
(2) 正相柱中流动相脱水不完全(2) 重新脱水
(3) 柱温变化(3) 用柱温箱恒温
保留时间不重复
(4) 缓冲液容量不够(4) 用较浓的缓冲液
(5) 柱内条件变化(5) 稳定进样条件,调节流动相
(6) 柱塌陷或形成短路通道(6) 更换色谱柱
出现无规律色谱峰长期进样滞留在柱中的组分被洗脱出来用强极性溶剂冲洗再用流动相平衡
(1) 色谱柱超载(1) 减少进样量
平顶峰