文档介绍:单向免疫琼脂扩散
单向免疫琼脂扩散
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2%离子琼脂;
PBS (,) ;
标准已知阳性血清;
稀释待测血清标本(浓度分别为1/30、5单向免疫琼脂扩散
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2%离子琼脂;
PBS (,) ;
标准已知阳性血清;
稀释待测血清标本(浓度分别为1/30、51/40、1/50) ;
免疫琼扩阳性血清;
已知标准琼扩抗原,诊疗抗原;
湿盒(容器内加湿纱布或泡沫塑料) ;
打孔器(孔径3mm) ;
打孔模板 ;
微量加样器;
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10mm
10mm
3mm
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血浆
主要作用是运载血细胞,运输维持人体生命活动所需物质和体内产生废物等。血浆相当于结缔组织细胞间质。是血液主要组成份,呈淡黄色液体(因含有胆红素)。血浆化学成份中,水分占90~92%,溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是各种蛋白质总称,用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。血浆蛋白质功效有:维持血浆胶体渗透压;组成血液缓冲体系,参加维持血液酸碱平衡;运输营养和代谢物质,血浆蛋白质为亲水胶体,许多难溶于水物质与其结合变为易溶于水物质;营养功效,血浆蛋白分解产生氨基酸,可用于合成组织蛋白质或氧化分解供给能量;参加凝血和免疫作用。血浆无机盐主要以离子状态存在,正负离子总量相等,保持电中性。这些离子在维持血浆晶体渗透压、酸碱平衡、以及神经-肌肉正常兴奋性等方面起着主要作用。血浆各种化学成份常在一定范围内不停地变动,其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等浓度最易受营养情况和机体活动情况影响,而无机盐浓度变动范围较小。血浆理化特征相对恒定是内环境稳态首要表现。
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血清:是指血液中既不含血细胞(血清不含红细胞和白细胞)也不含凝固因子成份;也就是除去纤维蛋白原血浆
血液凝固析出淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液快速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大区分。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了改变。这些成份都留在血清中并继续发生改变,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐步降低以至消失。这些也都是与血浆区分之处。但大量未参加凝血反应物质则与血浆基础相同。为防止抗凝剂干扰,血液中许多化学成份分析,都以血清为样品。 人体血液由有形成份和无形成份组成,白血球、红血球、血小板是有形成份,血清是血液中无形成份。用显微镜能够观察到血液中白血球、红血球、血小板等有形成份,血清为去除纤维蛋白原后无形成份,颜色微黄,透亮。 血清基础成份是水,水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成份,也溶有些人体代谢产物。血清中有抗体,这是被称作免疫球蛋白蛋白质。
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抗毒血清:
因制作时是将蛇毒、病原菌产毒等小量屡次地注射到免子、马血管内,每日慢慢加大注射量,一定时间后,因该动物体内产生抗体,经检测,到达一定效价后,就能够抽血。血液分离血清后再经提纯,就成了抗毒血清。 如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备,用来治疗对应***反应。 该生物制剂是异种血清,对人会有过敏反应,注射前均要做皮试。阴性可注射,阳性必需作脱敏疗法才行。
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破伤风抗***
是一个免疫马血清,对人体是一个异性蛋白,含有抗原性(过敏反应),所以在用药前先作过敏试验。试验结果为阴性可直接注射破伤风抗***,试验结果为阳性者,则应进行脱敏注射,即小剂量分4---5次注射破伤风抗***。在用过破伤风抗***超出一周者,如再使用,还须重作皮肤试验。
抗血清或抗体仍能产生可观察到标准免疫反应时稀释度。如抗血清效价为1:1000,即抗血清稀释1000倍时仍能产生可观察到免疫反应。
效价
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指抗体物理状态及其在体内滞留时间,以其与抗原反应多少来表示其免疫效果,称为抗体效价。
抗体效价测定
抗体效价测定是依据大分子颗粒抗原于其对应抗体相结合,在适量电解质存在及一定温度下,经过一定时间可出现肉眼可见凝集团块,医学称为凝集反应,普通均以标准抗原测定免疫血清或患者血清中抗体效价。
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