文档介绍：EB病毒（ EBV）核酸检测标准操作规程
（荧光 PCR法）
目的
规EB病毒核酸 DNA（荧光 PCR法）检测操作流程，准确进行 EB病毒 DNA分析。
应用围
使用大学达安基因股份 EB病毒核酸扩增 (PC打开，这时需要用鼠标点击这个标志将光
源打开。在卤钨灯已经被打开的情况下，软件界面右下方会显示（绿色）。
最好在仪器与光源预热 20分钟后开始实验。
在里，对所选孔进行设定，在 Well type 中设定 Standard （标准品）、 NTC（阴性
对照）、 unkown（样品）等，并选择正确的荧光通道（ FAM, HEX, ROX， Cy5），参
比荧光（ Reference dye）选 None。对于标准品，在 Well type 中设定为“ Standard ”
后，再设定其模板浓度。方法为：点击
，10倍的浓度梯度可以直接点击，在下拉
菜单中选择不同的系数关系后，依次点击设定为标准品的另外几个孔，浓度将实时
显示。也可以直接点击标准品的各个孔位，
在一栏，手工输入浓度。若要对不同
的样品进行编号，则双击所选孔，在name框中输入样品号，点击就能显示样品编号。
或者点击版面右上方的，导入以前使用的
96孔板设定。
点击，进行 PCR循环的设定，可以直接点击温度、时间改变各项温度、时间、循环
数等。在选定大步骤之后添加步骤可选定该大步骤后，点击，或点击鼠标右键，
在弹出的对话框中，选择 Add Segment，则可在该大步骤之后添加一个大步骤；若
是在选定大步骤里面的小步骤后边添加一小步骤，选中该小步骤，点击鼠标右键，在弹出的对话框中选择“ Add Plateau with Ramp ”。
要删除某个大步骤，直接选定大步骤，点击界面右边的“”，或者点击鼠标右键
选Delete ，即可删除该步骤。如果要删除一个大步骤里的小步骤，可先选定此步骤时间和温度中间的横线，将其变红，如图，点击界面右边的“”，或者点击鼠
标右键选 Delete ，即可删除该步骤。点击，导入以前设定的 PCR程序。
（END）代表在这一步结束时采集荧光信号；（ ALL）代表在这一步的全过程都采集荧光信号，一般用作熔解曲线分析。可直接用鼠标将此图标拖到要采集信号的地方。若要去除，可将其拖出循环设定区域。
结束之后，点击软件界面右上方的。会弹出对话框提示：仪器灯源正在预热，需
要“马上运行”或者是“灯预热完成后再运行”？通常可直接点击“马上运行”，
但最好点击“灯预热完成后再运行”，可以保护灯源。
软件界面右下方会出现运行状态显示框 RunStatus ，点击 Start 开始实验。在运行
过程中可以通过点击 Add Cycles 来增加扩增的循环数。还可以选择勾选“Turn lamp
off at end of run

”，在 PCR运行结束之后软件将自动关闭卤钨灯。
在PCR运行的过程中可以点击，观察样品的实时扩增原始结果。
PCR 运行结束后，点击，再点击 Results ，软件将自动进行结果分析，