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2荧光显微镜的结构及荧光染色.ppt

上传人:落意心冢 2022/2/17 文件大小:1.85 MB

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文档介绍

文档介绍:2荧光显微镜的结构及荧光染色

2. 初步掌握荧光显微镜的调节步骤和使用。
实验目的
实验用品
Olympus荧光显微镜,载玻片,盖玻片,擦镜纸,吖啶橙染料等实验用材料。
2荧光显微镜的结构及荧光染色

2. 初步掌握荧光显微镜的调节步骤和使用。
实验目的
实验用品
Olympus荧光显微镜,载玻片,盖玻片,擦镜纸,吖啶橙染料等实验用材料。
实验内容
一、荧光显微镜的成像原理
二、荧光显微镜的基本结构
三、荧光显微镜的使用方法
四、观察动植物细胞的自发荧光和继发性荧光
一、显微镜的成像原理
荧光显微镜是利用一定波长的光使样品受到激发,产生不同颜色的荧光,以用来观察和分辨样品中某些化学成分和细胞组分的一种显微镜。
自发荧光: 组织、细胞不经荧光色素染色,在紫外光照射下,某些成分所呈现的荧光,称为自发荧光 。
继发性荧光: 组织、细胞经荧光色素染色,由于荧光色素和组织细胞内的某种成分结合后而呈现的荧光为继发性荧光 。
二、荧光显微镜的基本结构和光路图
1. 基本结构:
光源:超高压汞灯,用以产生强光照(含大量紫外光 ,蓝紫光)
滤片系统:
激发滤色镜,提供一定波长范围的激发光 .
阻断滤色镜 ,透过相应波长范围的荧光 ,阻断 或吸收剩余激发光 .
二向分色镜,透射长波光线和反射短波光线的功能 .
荧光物镜
普通显微镜
荧光显微镜结构图
荧光显微镜的光路图
三 荧光显微镜的使用方法
:
切断电源 ,从插座上拔下电源线 .
开启灯室 ,将汞灯安装到灯架上 .
严防手指触摸灯管 ,特别是中心球状部分,以免污染
汞灯装入灯室 ,封上灯室盖后 ,方可按通电源 .
(一)荧光显微镜的调整方法
(二)荧光镜检样品的制作
1. 不能使用本身能产生荧光的药剂
2. 切片标本不能太厚
3. 因石蜡可产生青色荧光,采用石蜡制片时,脱蜡必须彻底。切片进入水后,应充分水洗,再经荧光染料处理。
4. 最好采用萤石玻璃制成的载玻片、盖玻片。
5. 封片时可采用甘油等无荧光的封固剂。
材料: 藻类, 鸭趾草下表皮, 动物结缔组 织, 血细胞, 花粉.
染液: %丫啶橙染液.
观察藻类,鸭趾草下表面叶绿体的自发荧光
丫啶橙染花粉, 血细胞, 疏松结缔组织。
四、观察动植物细胞的自发荧光和继发性荧光

?两者有何关系?怎样选用?
思考题
感谢您的聆听及指正