文档介绍：Chapter 3 Separate and investigate target e to ic e to ic EngineeringBy NieguangjunE-mail:@?从哪儿提取(Where)??怎么提取(How)??提到什么程度(What)??会出现什么问题(Questions)?如何解决(Solution)?主要内容核酸提取的原则和基本要求Principle and steps ? Principle ;(纯度和浓度)。? Requirements for ;(Pr、sugarand lipid) and steps ? (取材)(物理法、化学法、酶法);(蛋白质、脂类、糖类和不需要的核酸);-、,-:超声波处理法、研磨法、匀浆法;:用SDS或CTAB处理细胞;:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。破碎细胞-:小牛胸腺?动物肝脏、血液和肌肉组织等?鱼类精子;:种子的胚中都含有丰富的DNA。:谷氨酸菌体含7%~10%,面包酵母含4%,啤酒酵母含6%,大肠肝菌含9%~10%(培养过夜)。Note:从各种材料中提取DNA方法不同,分离提取的难易程度也不同。对于低等生物。如从病毒中提取DNA 比较容易,多数病毒DNA 分子量较小,提取时易保持其结构完整性。从高等动植物中提取DNA难度大一些。因分子量较大,易被机械张力剪断。破碎细胞(来源-方法)微生物:溶菌酶、SDS裂解。高等植物:捣碎器破碎、液氮研磨。酶法:蛋白酶,如胰蛋白酶,冰冻法:反复冻融或液氮冻后组织捣碎。动物:液氮处理后用匀浆器破碎。细胞器DNA:首先纯化细胞器。以上处理时均要同时加入核酸酶抑制剂