5-溴粉防己碱与粉防己碱对 K562A02 细胞多药耐药.pdf

文档介绍：
5-溴粉防己碱与粉防己碱对 K562/A02 细胞多药耐药
性逆转药联用逆转耐药的
机制之一[4]。
5-溴粉防己碱（BrTet）是由粉防己碱经溴化得到。该化合物具有逆转多药耐药的活性，
前期实验证明，BrTet 体外具有较强的 P-gp 抑制作用，而且不与主要代谢酶系结合，在大鼠
和犬体内也不影响表阿霉素的药代动力学参数[5]。
本实验主要研究了 BrTet 体外对于白血病细胞 K562/A02 多药耐药性的逆转作用，并与
传统汉防己甲素的逆转作用进行比较。

1本课题得到国家自然科学基金资助项目（No. 39970832, No. 30740062）；江苏省科技厅社会发展项目（No.
BS2004024）的资助。
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2. 材料和方法
试剂与仪器
新生胎牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品，RPMI-1640 培养基为 Gibco
公司产品，青霉素为华北制药股份有限公司产品，链霉素为华北制药股份有限公司产品，二
***亚砜(DMSO)分析纯为天津化学试剂一厂产品，四***偶氮唑蓝(MTT)为 Sigma 公司产
品，阿霉素(adriamycin，ADM)为浙江海正药业产品，粉防己碱(tetrandrine，Tet)购自浙江金
华制药厂, 5-溴粉防己碱（5-bromotetrandrine, BrTet）为成都康弘制药有限公司产品。CO2
培养箱、超净工作台为美国科学仪器厂产品，倒置相差显微镜为日本 Olympus 公司产品，
低温离心机为德国 Gyfnge 公司产品，流式细胞仪为美国 Couhor 公司产品，Model 550 酶标
仪为日本 BIO-RAD 公司产品。
细胞与细胞培养
K562 敏感细胞系由本实验室保存。K562/A02 细胞是经阿霉素逐步诱导、具有 MDR
表型的稳定细胞系，由中国医学科学院血液学研究所提供。K562/A02 细胞维持增殖的阿霉
素终浓度为 mg/L。接种于含体积分数为 10％ 小牛血清的 RPMI-1640 培养液（Gibco 公
司），置于 37℃、5% CO2 饱和湿度培养箱中，2-3 天传代一次。选取对数生