文档介绍:-
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ABO血型正、反定型操作规程
[目的]
保证ABO血型鉴定准确,确保临床输血平安。
[适用围]
***医院输血科
[职责]
具有-
-
O型
+
+
-
AB型
-
-
-
⑺凝集强度判断标准 〔同ABO血型的试管定型〕
[质量控制和考前须知]
1、分型标准血清试剂必须为三证齐全的合格产品,质量性能符合要求,且在有效期使用。试剂后必须贴上注有日期和人的标签,使用后应及时置于2~8
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℃专用冰箱中保存,以免细菌污染和变质而影响试验结果。试剂后有效期为一周。
2、商用分型标准红细胞试剂必须为三证齐全的合格产品,质量性能符合要求,且在有效期使用;自制分型标准红细胞试剂必须以3个安康者同型新鲜红细胞混和,用生理盐水洗涤 1~3次,以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原,再制成2~5%的红细胞悬液备用。试剂或制备后必须贴上注有或制备日期和人或制备人的标签,使用后应及时置于2~8℃专用冰箱中保存,以免细菌污染和变质而影响试验结果。试剂或制备后有效期为一周。
3、生理盐水启用后,有效期为二周。
4、所有试剂在使用时,必须检查是否有浑浊、变色、凝集等变质现象;凡可疑者,必须更换新的试剂进展检测。假设分型标准血清使用时间较长后,最好用的ABO标准红细胞检查结果是否与的血型相符;假设分型标准红细胞使用时间较长后,最好用的分型标准血清检查结果是否与的血型相符,以防标准血清或红细胞制品污染、变质失效而造成鉴定错误。
5、试管、滴管和玻片必须清洁枯燥,防止溶血。
6、操作方法应按规定进展,一般应先加血清,后加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。
7、IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反响温度以4℃为最强,但为了防止冷凝集现象的干扰,一般仍在室温(20~24℃)进展试验,37℃可使反响减弱。
8、离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结果。用试管法进展ABO血型的正定型时不能测出亚型〔如A*〕,需延长作用时间。
9、在反定型试验中,如果受检者的血清或血浆与O型标准红细胞产生阳性反响,则需要添加自身对照试验。如果自身对照试验为阳性,说明是自身冷凝集素导致。如果自身对照试验为阴性,则说明被检者血清或血浆中可能存在ABO系统以外其它系统的抗体干扰,此时需做其它相关试验加以解决上述定型问题。
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10、对含有较多自身冷凝集素的受检者,在使用标准血清进展正定型时往往被误定为AB型,遇到此种情况,需用37℃生理盐水洗涤受检者的红细胞2~3次,以去除吸附在红细胞上的冷凝集素,然后再鉴定血型。
11、观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。对于可疑结果,必须更换所用的试剂,重新检测。
12、对于可能存在不完全抗原的时候,应在各反响中参加凝聚***试剂,以检验不完全抗原的存在。
13、判断结果后应仔细核对、记录,防止笔误。
14、2~5%红细胞悬液的配制:先用生理盐水洗涤红细胞3次,再根据下表进展红细胞悬液的配制。
悬液浓度〔%〕
压积红细胞〔滴〕
盐水〔滴〕
2
1
40(2ml)
5
1
16 ()
[临床应用]
用于检验人的ABO血型归属。
[血型鉴定的影响因素及解决方法]
准确的血型鉴定是临床平安、有效输血的重要保证之一,但影响血型鉴定结果的因素很多。如发现ABO正反定型结果不一致,应先重复做1次试验。重复做试验时,应严格执行操作规程,使用质量合格的试剂,并细心观察和解释试验结果,就可解决明显的问题。对一些疑难问题必须做如下进一步研究:
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1、标本
①血标本的采集错误、稀释和溶血。另从受检者采集l份新鲜血液标本,这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不合。标本一般要求离体后尽快实验,最长不能超过3天,每次输血后受血者和供血者的血标本应在2~8℃保存7天。
②患者的药物使用有时也对实验有一定影响,当受血者使用肝素治疗时,应使用硫酸鱼精蛋白对抗使标本凝集;如果受血者使用右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷***〔PVP〕等治疗,应注意将红细胞洗涤。
③受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性肿瘤),以及类B或cisAB等。●如疑为A抗原或B抗原减弱,则可将受检红细胞与抗—A或抗—B血清做吸收及放散试验,以及用受检者唾液作A、B、H血型物质测定〔只对80%HAB分泌型的人