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MP核酸检测试剂盒说明书.docx

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MP核酸检测试剂盒说明书.docx

上传人:玥玥 2022/2/20 文件大小:31 KB

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MP核酸检测试剂盒说明书.docx

文档介绍

文档介绍:肺炎支原体( MP 核酸检测试剂盒( PCR 荧光法)说明书
【产品名称】
【适用仪器】
混匀后
2000rpm 离心 10sec , 100 C 水
浴或干浴 10min ,12000rpm 离心 10min ,上清供 PCF 扩增用(如样本裂解产物当天不
使用,请于 -20
C
MP 反应混合液
含 dTTP 、dATP dGTP dCTP 各 200umol/L 、 引物
XI
保存)。
F 150nmol/L 、引物 R 150nmol/L
、探 针 T 100 nmol/L
Taq 酶
含 Taq DNA 酶及抗体
14ul
MP 阳性对照
含 MP 基因组 DNA 重组克隆 )
100ul
阴性对照
主要成份为 % 的 NaCl 溶液
100ul

c. 阴性对照、阳性对照直接取出
50gl,加入 50 卩 l 核酸提取液,混匀后
100 C 水浴或干浴
X1
10min 。 12000rpm 离心 10min ,备用。
X1
注意:核酸提取液内含固体沉淀颗粒物,为使颗粒均匀分布,每次取样时请用吸头反复吸打。
X1
2. 试剂配制 (试剂准备区 )
注: 不同批号试剂盒中各组份不可以互换。
从试剂盒中取出
MP 反应混合液,在室温下融化并振荡混匀后,
2000rpm 离心 10sec 。计算需
准备样品数 n 份[ n= 样本数 +2
管对照品 ]。每测试反应体系配制如下:
【储存条件及有效期】
试剂 -20 C 可保存 12 个月
计算上述各试剂的使用量,加入一适当体积的离心管中,充分混匀后,按
36gl 量分装到
PCR 反应管中,转移至样本处理区。
ABI7300 、 ABI7500
荧光 PCR 扩增仪。


MP 反应混合液
Taq 酶
【样本要求】


分别加入 4 卩 l 阴性对照、 MP 阳性对照、样品处理上清液,盖紧反应管,转移至检测区。
PCR 扩增及荧光检测( PCF 检测区)
将各反应管按一定顺序放入
PCR 义上 ,按以下程序进行
PCR T 增:
步骤
循环数
温度
时间
1
1
95
C
3min
2
40
94
C
15sec
60
C
30sec
荧光通道检测选择:请选择 FAM 通道
【检验结果的解释】
阈值设定原则以阈值线超过正常阴性对照品的最高点及线性最佳为准,在阈值以上的荧光
曲线应当是具有明显的 S 型曲线,阳性对照 Ct 值应小于 38, 阴性对照