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大鼠冠状动脉平滑肌细胞的原代培养及鉴定.pdf

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文档介绍

文档介绍:中国心血管杂志 201 1 年 8 月第 16 卷第 4 期 # 3 0 9 #
.基 础 研 SM CS 体外 培养 方法
封接 , 影 响稳定 电流 的记 录 " 同时 CA sM cS 生 长 缓 大 鼠 CA SM C S 的原 代 培 养 SD 大 鼠 以 1%
慢 ,增 加 了对其 进 行 实验 研 究 的难 度 "本 研 究 旨在 戊 巴 比妥 钠 50 m 梦kg 行 腹 腔 内 注射 麻 醉 "在无 菌
探讨 CA SM Cs 体外 原 代分 离 及 培 养 的 理想 方 法 , 以 环境 下 取 出心脏 , 置于 4 e H an ks 液 中挤 压 出心脏 残
满 足膜片 钳及 细胞分 子水 平上 的实 验研究 需 要 " 留血液 , 用 H an ks 液 冲洗 3 遍 , 在体 式显 微镜 下 迅速
分离 出直径 蕊200 林m 的前 降 支 !右冠状 动 脉及 间隔
1 材料 和方法
支 "每 10 m in 换 1 次 H an kS 液 "去 内 皮 采 用 空 气
实验 动物 方法 ,将 10 ml 的空气 由血 管 的一 端 推人 , 经 另 一端
清洁级雄性 SD 大 鼠, 体质量 巧0 一20 9, 由首 流 出 , 利用 空气 使 内皮 细 胞死 亡 "判 断 去 内皮 成 功
都 医科 大 学 实 验 动 物 部 提 供 , 实 验 动 物 批 号 scxk 通过 以下方 法 验 证 :在 10 一/m oF L 乙酞 胆 碱 作 用 下
(京 2006一0009 ) , 实验前禁 食 1Z h " 不产 生舒 张反应 "
主要试剂 和仪 器 去除 内 皮 组 织 后 剥 除 血 管 外 膜 组 织 , 无 菌
木 瓜蛋 白酶 !牛 血 清 自蛋 白 (美 国 Gen vi ew 公 H an kS 液漂 洗 3 次 ,将 血管 置 于含 % BSA 的 PB S
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