血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量实验报告.doc

文档介绍：-
. z.
生物化学实验报告
姓 名：
学 号：
专业年级：
组 别：
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及-
. z.
生物化学实验报告
姓 名：
学 号：
专业年级：
组 别：
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量
实验日期
实验地点
合作者
指导教师
评分
教师签名
批改日期
实验目的
；
；
。
二、实验原理
，。，在电场中向正极移动。由于血清中各种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不同，在醋酸纤维素薄膜上电泳的速度也不同。因此可以将它们别离为清蛋白〔Albumin)、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带。
、分子量及含量
血清蛋白质 等电点 分子量 占总蛋白的％
-
. z.
清蛋白 69,000 57～72
α1－球蛋白 200,000 2～5
α2－球蛋白 300,000 4～9
β－球蛋白 90,000～150,000 ～12
γ－球蛋白 ～ 156,000～950,000 12～20
缓冲液pH=，pI＜pH。
血清蛋白带负电荷，在电场中向正极移动。
预测血清蛋白电泳区带图
血清蛋白依次分为清蛋白，球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带
.①膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带；②各色带蛋白质含量与染料结合量根本成正比；③可将各色带剪开，分别溶于碱性溶液中；④用分光光度法计算各种蛋白质的百分数。
三、材料与方法：
：
：①样品：安康人血清〔新鲜、无溶血〕；②巴比妥-巴比妥钠缓冲液〔，〕；③氨基黑10B染色液；④漂洗液；⑤洗脱液：。
：①V-1100分光光度计〔×1〕；②恒温水浴箱〔×1〕；③试管〔×6〕、试管架〔×1〕；④1000μL加样枪〔×1〕、加样枪架〔×1〕；⑤醋酸纤维薄膜〔2cm*8cm，厚度120μm〕；⑥培养皿〔×5〕；⑦点样器或载玻片〔×1〕；⑧平头镊子〔×2〕；⑨剪刀〔×1〕；⑩电泳槽〔×1〕；⑪直