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松材线虫伴生菌中产纤维素酶细菌的筛选、鉴定及其相关基因的克隆.pdf

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文档介绍

文档介绍:Short Communication 研究简报
微生物学报 Acta Microbiologica Sinica
52(11) :1408 - 1414; 4 November 基金项目:国家自然科学基金(31100104) ;校专项人才启动基金 ( ZX2011004) ;河南省高等学校青年骨干教师资助项目;车用生物燃料技
术国家重点实验室开放课题资助项目
作者简介:牛秋红(1979 - ) ,女,河南焦作人,副教授,博 士,从 事 线 虫 病 原 细 菌 与 其 宿 主 相 互 关 系 的 研 究。 Tel / Fax: + 86-377-63525086;
E-mail:qiuhongniu@ yahoo. com. cn
收稿日期:2012-05-15;修回日期:2012-06-21牛秋红等: 松材线虫伴生菌中产纤维素酶细菌的筛选、鉴定及其相关基因的克隆. / 微生物学报(2012)52(11) 1409
外降解纤维素的微生物研究多集中于真菌,比较典 Kit 等分子生物学试 剂 ( TaKaRa) ;引物合 成 及序 列
型的有木酶属( Trichoderma) 、曲霉属( Aspergillus) 和 测定( 上海生工) ;PCR 仪、核酸电泳仪、紫外凝胶成
青霉属 ( Penicillium) 。而 细 菌 繁 殖 和 产 酶 速 度 快、 像分析系统( Biorad) 、各型规格移液器( Eppendorf) ;
发酵周期短,遗 传 背 景 比较 清 楚,更有 利 于 工业生 小型 离 心 机 ( Eppendorf 5418 ) ; 恒 温 培 养 箱 ( ZSD-
产,故近年 来 应 用 细 菌 产 纤 维 素 酶 日 益 引 起 重 视。 1160 型,上海智城分析仪器制造有限公司) ;纯水制
郭成栓等从一株产碱性纤维素酶的短小芽胞杆菌菌 备系统( Milipore) 。
株 H9 中克隆 到了 编 码 葡 聚糖 内 切 酶 的 基 因,并 对 1. 2 产纤维素酶细菌菌株的筛选
其基因序列及酶的结构域进行了分析预测[3];刘永 本实验用到的松木采自河南南阳疫区,处理方
生等对 地 衣 芽 胞 杆 菌 GXN151 的 纤 维 素 酶 基 因 法如下:用无菌 水 将松 木浸泡3 d,离心,去上 清,对
cel12A 的序列 进 行 了 分 析 并 在 大 肠 杆 菌 中 进 行 了 津液中的松材线虫条数进行镜检,确保