文档介绍：对审查意见(Ⅰ)的回复
[1]文字不够精练和流畅。
【回复】语言已经进一步精练,体例和格式已按修改意见并参考2004年2月的《化工学报》修改。具体记录见后。
[2]因为该文中并没有将CAT真正地提取出来。而是将其定位在线粒体和过氧化物酶体地沉淀组分中,所以“快速提取”地提法并不确切。
【回复】接受审查意见。本文建立的CAT部分提纯方法是为了酶活的测定。重点在于能够表征热带假丝酵母菌CAT酶活的真实情况,并保证方法的可靠性。相对于酶(蛋白质)纯化工作的耗时,本方法是快速的。根据审查意见及考虑严谨性,将“快速提取”改为“快速部分提纯”。
分别在文中下列地方作了相应修改:
P1. 中文摘要第1行:“快速提取”改为“快速部分提纯”
P3. 末段第3行:“提取”改为“部分提纯”
P7. 第1行,“提取”改为“部分提纯”
P13 结论第1行,“提取”改为“部分提纯”
[3]关于描述重组菌产酸和烷烃转化率的段落。因为发酵过程中影响因素很复杂,产物产量的变化也很大。摇瓶培养中产物10%左右的变化并不算大。关键看重复性是否好。所以,是否能列表说明做了几次重复实验,每次实验结果间的误差。以说明这种变化是稳定的和显著的。
【回复】接受审查意见。发酵过程中影响因素众多,因此本文在研究过程中也非常重视重复性,在P10末段中有论述(“多次考察了……”)。从严谨性考虑,已经增加重复实验的数据。见P11页的 Table 1. Comparison of the binant and wild type on dicarboxylic acid productivity and conversion rate of alkane.
[4]建议增加构建CAT缺失重组菌株以及PCR等方法证明过程的内容。以增加其完整性。
【回复】本文没有论述CAT缺失重组菌株构建和PCR验证过程,是出于以下两点考虑:第一,本文着重于CAT酶活测定方法的建立和重组菌产酸性能的研究,基因工程的内容与本文标题不太相符;第二,若增加此部分内容,则显得内容过多。但由于此部分工作是本文的基础,文中对此会给出简明扼要的描述,并引用公开发表的文献说明。
见文献9,已作详细说明。
对审查意见(Ⅱ)的回复
[1]能进一步把本文的工作和前期有关基因敲出部分的工作区别开来。本文显然不涉及基因方面的工作,文中有些地方论述过于模糊。另外,对于前期工作最好能引用已公开发表的文献。
【回复】本文是建立在前期工作的基础上的,因此会简明扼要地提及前期工作的结果。对于文中论述模糊和用词不当的地方已做详细修改。引用的文献9是公开发表的国际会议论文。会议名称为:Asia Pacific Biochemical Engineering Conference (APBioChEC 03) Brisbane, Australia.
[2]第八页最后一段对前期有关CAT基因工作的描述易引起误解,让人以为只是获得了敲除CAT基因的热带假丝酵母的杂合子,而不是纯合子,即热带假丝酵母的一套染色体上缺失了CAT基因而在另一套染色体上CAT基因还存在。大家知道,这种杂合子是不稳定的,表型也很快会发生变化,对其性质进行研究也就没有多大意义了。因此请作者重新把前期有关基因部分的工作论述清楚。
【回复】热带假丝酵母是二倍体(核内有