文档介绍：牛乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LTF)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
产品编号：E0780b
1000 x g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将标本放
于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：以上标本置 4℃保存应小于 1 周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过 3 个月，-80℃不应超过 6 个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测；高血脂
的标本不需进行特殊处理，可直接检测。
操作步骤
实验开始前，请提前配制好所有试剂；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起
泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，均应用样品稀释液进行稀释，以使样品
符合试剂盒的检测范围。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100ul，余孔分别加标准
品或待测样品 100ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，
轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应 120 分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液 A 工作液 100ul（取 1ul 检测溶液 A 加 99ul
检测稀释液 A 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60 分钟。
3. 温育 60 分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板 3 次，每次浸泡 1-2 分钟，350ul/每孔，甩干
（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液 B 工作液（同检测 A 工作液） 100ul，37℃，60 分钟。
5. 温育 60 分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板 5 次，每次浸泡 1-2 分钟，350ul/每孔，甩干
（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液 90ul，37℃避光显色（30 分钟内，此时肉眼可见标准品的前 3-4 孔有
明显的梯度兰色，后 3-4 孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液 50ul，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底
物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在 450nm 波长依序测量各孔的光密度（OD 值）。 在加终止液后立即进行检测。
注