文档介绍：南方医科大学硕士学位论文肛门失禁动物模型的构建姓名:傅晓静申请学位级别:硕士专业:外科学普通外科指导教师:黄宗海20090527硕士学位论文肛门失禁动物模型的构建硕士研究生:傅晓静指导教师:黄宗海教授摘要研究背景肛门失禁是持续性或反复发作的不能感知肠内容物性状或不能控制肠内容物的排出,包括液态、气态、固态的肠内容物,是复杂的、多因素导致的排便功能紊乱,表现为对气体或粪便控制能力的损害,导致排便次数增多,常有腹泻。这些临床症状经常导致患者拒绝参与社交活动并严重影响患者的日常生活。虽然相继提出多种手术及非手术治疗方式,但各有其局限性与缺点,顽固性肛门失禁仍然是内、外科临床上十分难处理的问题。为此,我们试图研制出一种制作肛门失禁动物模型的方法,以期望为制作肛门失禁动物模型提供一剩t新的思路,为治疗肛门失禁疾病的研究做好基础性工作。鉴于国内外学者目前采用的造模方法,研制的新造模方法期望达到的目标主要有:①操作简单,无需昂贵的实验仪器及实验试剂,易于推广;②微创操作,动物死亡率低;③造模效果确切、稳定。根据既往研究成果,肛f-JCb括约肌在排便节制中扮演着重要的角色,其支配神经为骶神经。Cosovi6E等研究发现局部注射高浓度局麻药物,可使神经在1周后出现变性。局麻药物神经损害程度呈浓度依赖性,其浓度愈高,损害程度愈重,直至运动、感觉功能永久性丧失。另外,当药物浓度达到临界水平时,局麻药具有去污剂性质,可导致神经细胞膜结构破坏,此过程呈不可逆性改变。,可导致末梢神经阻滞,应用于三叉神经痛的治疗。基于上诉理论,我们初步探索了一种新的肛门失禁动物模型的制作方法,通过功能性定位肛门外括约肌支配神经,局部注射神经毒性药物,选择性破坏中文摘要肛门外括约肌支配神经,使其效应肌,即肛门外括约肌发生功能障碍,成功制作出肛门失禁的动物模型。目的基于操作简单、经济实用、微创操作、造模效果确切稳定的理念,研制出一种制作肛门失禁动物模型的新方法,以期望为制作肛门失禁动物模型提供一利t新的思路,为治疗肛门失禁疾病的研究做好基础性工作。方法l、实验动物及分组8月龄健康成年雄性新西兰兔30只,,普通级饲养。30只新西兰兔按随机数字表随机平均分为5组,对照组A(n《),局部注射药物为生理盐水,术后8周取局部组织做病理检查;实验组B(n=6),局部注射药物为50∥L罗哌卡因,术后4周取局部组织做病理检查;实验组C(n_6),局部注射药物为509/L罗哌卡因,术后8周取局部组织做病理检查;实验组D(n=6),,术后4周取局部组织做病理检查;实验组E(n=6),,术后8周取局部组织做病理检查。2、动物的麻醉本次实验动物的麻醉均采用309/L戊巴比妥lml/kg静脉注射麻醉。3、测术前动物麻醉状态下肛管内静息压力(analcanalrestingpressure,ARe)固定动物,肛门周围及骶部脱毛,肛管内置入测压水囊,连接三通管、压力标定表、压力电信号转换器、十六道生理信号采集系统PowerLab16/30(ML880)、DualBioAmp/Stimulator(ML408),测动物麻醉状态下ARP。4、功能性定位双侧第4荐神经并对肛门外括约肌行肌电图(electromyography,EMG)检查在离穿刺部位较远处安置无关电极一枚,与穿刺针及脉冲器连接形成环路,在肛门外括约肌上置2枚感应电极。,脉冲频率lHz。在兔骶部扪及骶骨下部,按照第4荐神经的解剖部位进行定位穿刺。当与刺激电极相连的穿刺针进针达一定深度,出现与脉冲电流同步U硕士学位论文的肛f-J多,b括约肌收缩运动时,表明穿刺针接近或抵达第4荐神经,,肛门外括约肌仍在收缩运动,表明已刺巾第4荐神经。记录电极刺入的位置、方向、深度。调整刺激电流参数设置为方波,频率1Hz,波宽50us,强度5mA。记录肛门外括约肌的EMG图形。5、神经周围注射药物在维持上述电流刺激及监测肛管内压力变化的情况下,于定位好的第4荐神经处,回抽无血液,在两侧第4荐神经处缓慢注射药物。:B、+肾上腺素(1:250000);D、+肾上腺素(1:250000)。均分两侧第4荐神经处注射。6、测术后4周麻醉状态下B组、D组动物ARP麻醉并固定动物,肛门周围及骶部脱毛,肛管内置入测压水囊,连接三通管、压力标定表、压力电信号转换器、十六道生理信号采集系统PowerLab16/30(ML880)、DualBioAmp/Stimulator(ML408),测动物麻醉状态下ARP。