文档介绍:谷丙转氨酶的测定(改良赖氏法)1谷-丙转氨酶(ALT),催化丙氨酸与α-***戊二酸生成谷氨酸和***酸:2金氏法(King法)、穆氏法(Mohun 法)和赖氏法(Reitman-Frankel法)。其原理、试剂、操作步骤及作用温度等完全相同。不同之处在于作用时间:King法60min ,Mohun法和Reiman法30min。King法单位定义是:每1ml血清在37℃条件下与底物作用60 min,生成1μmol***酸称为一个单位。Mohun 法单位定义是:每毫升血清在pH=,37℃条件下与底物作用30 min,***酸为1单位。赖氏法没有制定自身的单位定义,而是以实验数据套用速率法的卡门氏单位。1个卡门氏单位的定义是:在温度25℃,,波长340nm,光径1cm的条件下,。卡门氏单位不是用物质的量浓度,而是用物质的吸光度表示酶的活性单位的。若将卡门氏单位的定义条件代入国际单位计算公式,即得卡门氏单位与国际单位的换算关系:1卡门氏单位= IU/L(25℃),便可将卡门氏单位兑换成国际单位。34简便,但?-***戊二酸的干扰使得实验设计上对总体思路的彻底达成有一定难度。5还原辅酶I在340nm处有最大光吸收,因此伴随还原辅酶I不断被氧化,340光吸收值随之下降,下降速率和ALT活力成比例,籍此测定ALT活力。特异性、精确度高特异性、精确度高但,实验条件要求高连续监测(速率)法测定6比色法原理:速率法原理:两种方法各有很强的优势与不足,而他们测定的是同一个体系,可否巧妙的取长补短?7改原赖氏法的反应温度改原赖氏法的反应温度(40(40℃℃改为改为3737℃℃))和底物浓度和底物浓度((改为低浓度改为低浓度))的的改良赖氏法,对卡门氏单位的科改良赖氏法,对卡门氏单位的科学套用,使比色法一些缺陷得到学套用,使比色法一些缺陷得到了卓有成效的克服,使其结果与了卓有成效的克服,使其结果与速