文档介绍：微生物大小与数量的测定实验报告
山东大学实验报告 2017年11月27日
________________菌器等，它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液
二）微生物数量的测定
1. 菌悬液制备
以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当的菌悬液。
2．镜检计数室
在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数。
3．加样品
将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用换上新枪头的移液枪移取少量摇匀的酿酒酵母菌悬液，之后由盖玻片边缘缓缓注入一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，一般计数室均能充满菌液。（取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有气泡产生。）
4．显微镜计数
加样后静止5min，然后将血细胞计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。调节显微镜光线的强弱适当，对于用反光镜采光的显微镜还要注意光线不要偏向一边，否则视野中不易看清楚计数室方格线，或只见竖线或只见横线。
5．清洗血细胞计数板
使用完毕后，将血细胞计数板在水龙头用水冲洗干净，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用吹风
机吹干。之后镜检，观察每小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求细菌每小格内约有5～10个菌体为宜，酵母菌每小格内约有2～6个菌体为宜。每个计数室选5个中格(可选4个角和中央的一个中格)中的菌体进行计数。位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。如遇酵母出芽，可按照各人****惯记或者不记芽体，但要在结果中注明芽体数目是否算入。
实验结果
目镜测微尺的校准结果
物镜类型
放大倍数
物镜测微尺每格长度
目镜测微尺每格长度
4
10μm
50μm
低倍镜
10
20μm
高倍镜
40
5μm
油镜
100
2μm
大肠杆菌和酵母菌菌体大小的测量结果
大肠杆菌
酵母菌
1
2
3
平均
观察方式
1
2
3
平均
观察方式
长

油镜
直径
7
8
7
7
高倍镜
宽

测量结果
× μm
测量结果
7 μm
酵母菌数目的测定结果
各中方格中菌数
五中方格中总菌数A
稀释倍数B
每毫升菌液中菌数n
1
2
3
4
5
46
45
42
55
44
232
5
×10^7
思考题
(1)为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台微尺重新对目镜测微尺进行校正？
答：因为目镜测微尺每一组的长度都是对应一个特定的放大倍数，在更换不同放大倍数的目镜或物镜之后，整个显微镜所观测到物体的整体放大倍数发生了改变，那么原来的目镜测微尺的标度就不再适用了，需要进行重新标定。
(2)在不改变目镜和物镜测微尺，而