文档介绍：第一部分PPAR-7过表达及罗格列***对ETol诱导乳鼠心肌细胞肥大的影响目的:以ET·1刺激培养新生SD大鼠心肌细胞建立心肌肥大模型,观察PPAR-y过表达及罗格列***,。方法:采用MTT法、【3H】亮氨酸掺入法、细胞表面积测定法、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因转染等实验方法,观察了(1)在培养新生SD大鼠心肌细胞使用罗格列***与GW9662的安全浓度;(2);(3)罗格列***及过表达PPAR-y对ET-l诱导的心肌细胞肥大及表型转变的影响;(4)罗格列***-TmRNA表达的影响。结果:1、本实验中GW9662和罗格列***的浓度分别为1、101aM,均为适用与新生SD大鼠心肌细胞的安全浓度。2、l、10、100、1000nMET-1处理24h可剂量依赖性引起培养乳鼠心肌细胞蛋白质合成(【3H】亮氨酸掺入)增加,其中100nMET-1诱导蛋白质合成增加较对照组有极显著性差异(尸<)。罗格列***()和CsA(1州)可抑制ET-1所致心肌细胞蛋白合成增加(Rosi,.70%,P<;CsA,.59%,P<),且罗格列***的效应可被GW9662(1I_tM)所逆转(+98%,P<)。3、,而罗格列***(IOpM)预处理可明显抑制该效应(.55%,P<),(.47%,P<)。4、(,P<)。10laM罗格列***预处理及过表达PPAR-(Rosi,.74%,P<;PPAR-q,,.87%,P<)。5、-7mRNA在心肌细胞的表达(.43%,P<),而10laM罗格列***(+89%,P<)。H结论:l、激活及过表达PPAR-7可抑制ET-1诱导的心肌肥大反应。2、ET一1可通过下调PPAR-7表达诱导心肌肥厚的发生。关键词:;心肌肥大;过氧化物酶体增殖物活化型受体吖;过表达;活化T细胞核因子第二部分激活PPAR-,,/对ET—l诱导的乳鼠心肌细胞calcineurin/NFATc4信号通路的影响·目的:作为核受体PPARs的一种亚型,PPAR-7的下调和灭活可能参与了高血压左心室病变的发病过程。尽管文献报道PPAR-,r是心肌肥厚的重要调节因子,但是PPAR-7激活后抑制心肌肥厚的机制尚未完全明了。本实验采用PPAR-7激动药罗格列***-7质粒作为干预药物,、蛋白质表达及酶活性的影响,以及对NFATc4核转位的影响。探讨激活PPAR-T后抑制ET-1诱导的心肌肥大反应是否通过calcineurin/NFATc4通路。方法:,采用逆转录聚合酶链式反应()、蛋白免疫印迹(Westernblot)技术、免疫荧光技术、免疫共沉淀技术等方法,观察了(1)罗格列***;(2)罗格列***;(3)罗格列***及过表达PPAR-;(4)罗格列***对PPAR-7和NFATc4相互作用的影响;结果:1、10、100、、3、。10I_tM罗格列***(一56%,P<),而GW9662可逆转罗格列***的作用(+88%,P<)。2、(+61%,P<),罗格列***(.48%,P<),而GW9662逆转了罗格列***的作用(+46%,P<)。与对照组相比,(+51%,尸<),罗格列***(-37%,P<),而GW9662逆转了罗格列***的作用(+62%,尸<)。3、。随刺激时间延长,发