无菌检查操作规程.doc

文档介绍：无菌检查操作规程
无菌检测室消毒操作规程
1. 目的：建立一个无菌检测室消毒操作程序
2. 范围：适用于需消毒的无菌检测房间
3. 责任：质检科无菌岗位人员
4. 程序：

，培养 3天； 取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天。逐日观察结果。
空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查
符合规定。
、冲洗液及其制备方法
稀释液、冲洗液配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。
%蛋白胨水溶液 ，加水1000ml，微温溶解，滤清，调节 ?，分装，灭菌。
***化钠-蛋白胨缓冲液 、、***、，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。 ，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂
等。


，应进行方法的验证，以证明所采用的方法适合
于该药品的无菌检查。若药品的组分或原检验条件发生改变时，检查方法应重新验证。 ，按“供试品的无菌检查”的规定及下列要求进行操作。对每一试验
菌应逐一进行验证。

同培养基灵敏度检查。

将规定量的供试品按薄膜过滤法过滤，冲洗，在最后一次的冲洗液中加入小于
100cfu的试验菌，过滤。取出滤膜接种至硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基中，
或将培养基加至滤筒内。另取一装有同体积培养基的容器，加入等量试验菌，作为对照。
按规定温度培养3～5天。各试验菌同法操作。

取符合直接接种法培养基用量要求的硫乙醇酸盐流体培养基8管，分别接入小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2管；取符合
直接接种法培养基用量要求的改良马丁培养基4管，分别接入小于100cfu的白色念珠菌、
黑曲霉各2管。其中1管接入规定量的供试品，另1管作为对照，按规定的温度培养3～5天。

与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则供试品的该检验量在
该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检查法和检查条件进行供试
品的无菌检查。如含供试品的任一容器中微生物微弱、缓慢或不生长，则供试品的该检
验量在该检验条件下有抑菌作用，可采用增加冲洗量，或增加培养基的用量，或使用中
和剂或灭活剂如β－内酰***酶、对氨基苯甲酸，或更换滤膜品种等方法，消除供试品的
抑菌作用，并重新进行方法验证。

方法验证试验也可与供试品的无菌检查同时进行。


：全封闭检测器、一次性过滤器
：玻瓶产品：每种培养基最少检验数量为10瓶。
塑袋产品：每批产品数量＞200袋时，每种培养基最少检验数量
为10袋；每批产品数量?200袋时，每种培养基最少
检验数量为5%或2袋（取较多者）。
阳性对照：供试品无菌检查若采用薄膜过滤法，应增加1/2的最
小检验数量作阳性对照用；若采用直接接种法，应增
加供试品1瓶（袋）作阳性对照。 ：供试品装量在100ml-500ml，需接种全量；供试品装量在500ml
以上，需接种1000ml。
： 100ml

应根据供试品特性选择阳性对照菌：无抑菌作用及抗革兰阳性菌为主的供试品，以
金黄色葡萄球菌为对照菌；抗革兰阴性菌为主的供试品以大肠埃希菌为对照菌；抗厌氧
菌的供试品，以生孢梭菌为对照菌；抗真菌的供试品，以白色念珠菌为对照菌。阳性对
照试验的菌液制备同培养基灵敏度检查（大肠埃希菌的菌液制备同培养基的灵敏度检查
中的金黄色葡萄球菌），加菌量小于100cfu，供试品用量同供试品无菌检查每份培养基
接种的样品量。阳性对照管培养48～72小时应生长良好。
，应取相应溶剂和稀释液同法操作，作为阴性对照。阴性
对照不得有菌生长。
，若需