文档介绍：硬脂酸镁的微生物限度检查
一、 概述
本报告按 USP31 中“〈 61-62〉非灭菌产品的微生物学检查”的规定，对硬脂酸 美的微生物学检查方法学考察。 参照企业提供标准， 通过测试实验制定适合于本 品的微生物学检查的方法。
企业提供供试液40mL （相当于1g）至400mL灭菌TSB，混匀，置 30至35C培养18至24小时。
阳性组1:接种50-100cfu大肠埃希菌至灭菌TSB中，置30至35C培养18 至24小时。
实验组1:取1:40供试液40mL（相当于1g）和50-100cfu大肠埃希菌至400mL 灭菌TSB，混匀，置30至35C培养18至24小时。
阳性组2:取1mL灭菌TSB和50-100cfu大肠埃希菌至100mL灭菌麦康凯肉
汤中，置42至44C培养24至48小时；划线接种至麦康凯琼脂，30至35C 培养 18 至 72 小时。
实验组2:取TSB预培养物1mL和50-100cfu大肠埃希菌至100mL灭菌麦康 凯肉汤中，置42至44C培养24至48小时。划线接种至麦康凯琼脂，30至 35T培养18至72小时。
沙门氏菌
预培养：无菌操作取 10g硬脂酸美置灭菌过的三角烧瓶，加入 45°C的
400mL1%吐温-80的灭菌TSB，振摇使分散均匀，置30至35 C培养18至24 小时。
阳性组1:接种50-100cfu霍乱沙门氏菌至灭菌的1%吐温-80的TSB中，置 30至35C培养18至24小时。
实验组1:无菌操作取10g硬脂酸美置灭菌过的三角烧瓶，加入45C的400mL 灭菌的1%吐温-80的TSB，振摇使分散均匀。加入 50-100cfu霍乱沙门氏菌 置30至35C培养18至24小时。
阳性组2: （含1%吐温-80）和50-100cfu霍乱沙门氏菌至 10mL灭菌RVS肉汤中，30至35C培养18至24小时；划线接种至 XLD琼 脂, 30至35C培养18至48小时。
实验组2:取TSB （含1%吐温-80）-100cfu霍乱沙门氏 菌至10mL灭菌RVS肉汤中，30至35C培养18至24小时；划线接种至XLD 琼脂，30至35C培养18至48小时。
4、 讨论
表格3至表格 5表明本品涉及到所有培养基均符合微生物学检查用的要求。 培养基的灭菌方式各异，参见表格 1 。表格 6 至表格 8 表明硬脂酸美并不抑制各 株测试菌的生长。 计数实验中， 胶囊壳自身的颜色使得琼脂清晰度降低， 使得对 3 株细菌（枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌）的计数较为困难， 但并不影响黑曲霉和酵母菌的计数。 因此，通过方法适用性实验， 确定以增加培 养基体积的方式使得平皿计数可行。 控制菌检查方法依照常规方法即可满足。 本 品微生物学检查方法的具体内容在后续细述，详见“微生物学检查检验操作程
序”。
三、 微生物学检查检验操作程序
1、 供试样品制备
以 70%的乙醇擦拭供试品的外包装，使自然挥干。无菌操作取 10g 硬脂酸
美置灭菌过的三角烧瓶，加入的 45C含1%吐温-***化钠蛋白胨缓 冲液，振摇使分散均匀，制成1:40的供试液。取1:40供试液4mL至6mL ***化钠蛋白胨缓冲液，制得
1:100供试液。