文档介绍：关于菊花的组织培养
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课题1 菊花的组织培养
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1、熟悉植物组织培养的基本过程
2、了解植物组织培养的影响因素
3、掌握植物组织培养的操作过程些明显的不同？
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微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
阅读课文，思考以下问题
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？
组织的脱分化及愈伤组织的再分化。
植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素。
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激素配比对组织培养的影响
在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。
高 利于根分化、抑制芽的形成
生长素/细胞分裂素
低 利于芽的形成
适中 利于愈伤组织的形成
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活动2：
用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?（提示：怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? ）
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二、实验操作
（一）制备MS培养基
（二）外植体消毒
（三）接种
（四）培养
（五）移栽
（六）栽培
实验操作流程：
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2、实验具体操作
二、实验操作
（1）制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
①配制各种母液
配制母液时，大量元素浓缩__________ ，微量元素浓缩__________ ，常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照__________的质量浓度单独配制母液。
用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
1mg/ml
4
10倍
100倍
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二、实验操作
②配制培养基。
2、实验具体操作
（1）.制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
4
植物激素
在菊花组织培养中，可以不添加_________________ ，原因是菊花茎段组织培养___________________ 。
比较容易
配制培养液
调PH
培养基的分装
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二、实验操作
③灭菌
将分装好的培养基连同其他器械一起进行
_________________。
2、实验具体操作
（1）.制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
4
高压蒸汽灭菌
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2、实验具体操作
二、实验操作
（2）外植体消毒
①选取菊花茎段时，要取 ________________。
流水冲洗
酒精
无菌水
***化***
无菌水
②消毒流程：
浓度______
摇动_____次
时间_____s
浓度______
时间_____min
至少清洗___次
漂净_______
生长旺盛的嫩枝
70%
2～3
6～7
%
1～2
3
消毒液
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不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受能力。
在外植体消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？
思 考
？
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2、实验具体操作
二、实验操作
（3）接种
①前期准备：用_________________消毒工作台，点燃酒精灯。所有工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用_________________灭菌。
②接种操作：插入外植体时_________________端朝上，每个锥形瓶接种_________________个外植体。
70％的酒精
火焰灼烧
形态学上
6～8
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你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？
思 考
？
每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
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2、实验具体操作
二、实验操作
（4）培养